P物質(zhì)和降鈣素基因相關肽對成骨細胞的增殖和堿性磷酸酶活性的影響.pdf

1、在正畸牙齒移動過程中，發(fā)現(xiàn)牙周內(nèi)P物質(zhì)(SP)和降鈣素基因相關肽(CGRP)表達明顯增強。牙周神經(jīng)肽和正畸之間存在著密切的聯(lián)系。但SP和CGRP在正畸組織改建中發(fā)揮什么樣的作用?其機制如何?目前還不清楚。本研究采用體外細胞培養(yǎng)的方法，觀察SP、CGRP對大鼠成骨細胞的增殖和堿性磷酸酶(ALP)活性的影響。為深入了解SP、CGRP在正畸組織改建中的作用和機制提供一些理論參考依據(jù)。主要研究內(nèi)容及結果如下： 1、大鼠成骨細胞的原代培養(yǎng)

2、、純化及鑒定 本實驗采用新生SD大鼠顱蓋骨通過酶消化法與組織塊法相結合進行成骨細胞的原代培養(yǎng)，并利用差速粘附法對原代細胞純化。采用堿性磷酸酶染色、Vonkossa染色、四環(huán)素染色方法對細胞進行鑒定，三種染色結果均呈陽性表明了培養(yǎng)的細胞為成骨細胞。 2、P物質(zhì)對成骨細胞的增殖和ALP活性的影響 用含有終濃度為0、1×10-12、1×10-10、1×10-8、1×10-6mol/L的SP作用成骨細胞，觀察SP對成骨細

3、胞的增殖和ALP活性的影響。結果發(fā)現(xiàn)SP在1×10-10mol/L，1×10-8mol/L，1×10-6mol/L時，對細胞計數(shù)結果均有影響，與對照組比較均有顯著差異(p＜0.05)；在1×10-8mol/L時對MTT計數(shù)及ALP活性結果影響最大。當SP在1×10-8mol/L時，對細胞周期影響最大，S+G2/M期細胞數(shù)量最多。 3、CGRP對成骨細胞的增殖和ALP活性的影響 選用含有終濃度為0、1×10-12、1×10