PDGF-BB與bFGF對(duì)人牙周膜細(xì)胞增殖與堿性磷酸酶活性的影響.pdf

1、目的：細(xì)胞因子對(duì)牙周組織細(xì)胞增殖具有重要的促進(jìn)作用，對(duì)其特性也具有很大影響。本實(shí)驗(yàn)旨在探討血小板衍生生長(zhǎng)因子(platelet derived growth factor-BB,PDGF-BB)與堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)對(duì)人牙周膜細(xì)胞(periodontalligament cells，PDLC)增殖與堿性磷酸酶(alkaline phosphatase，ALP)活

2、性的影響，從而探討這兩種因子對(duì)人牙周組織再生性修復(fù)的作用。 方法：從第3代開(kāi)始體外培養(yǎng)人牙周膜細(xì)胞，取4-8代細(xì)胞分為空白對(duì)照組與實(shí)驗(yàn)組，實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞用不同濃度的PDGF-BB(0.1，1，10，100ng/ml)，bFGF(1，10，50，100ng/m1)與PDL作用。檢測(cè)增殖：第3天后，用MTT法檢測(cè)細(xì)胞增殖情況，找到兩種因子的最大與最小顯效濃度。然后分別用最大與最小顯效濃度單獨(dú)或聯(lián)合作用于PDL細(xì)胞，于作用1、3、6、9天

3、后用MTT法檢測(cè)細(xì)胞增殖情況。檢測(cè)酶活性：除單獨(dú)作用外，也進(jìn)行兩種因子增殖作用的最大與最小顯效濃度聯(lián)合干預(yù)。PDGF-BB與bFGF單獨(dú)或聯(lián)合對(duì)細(xì)胞作用第3天后，人工裂解一半細(xì)胞，已裂解的一半細(xì)胞為裂解液組，未裂解的一半細(xì)胞為培養(yǎng)液組，用堿性磷酸酶試劑盒檢測(cè)ALP活性(用吸光度值表示)。 結(jié)果：細(xì)胞增殖：第3天PDGF-BB最大顯效濃度為10ng/ml，最小顯效濃度為1ng/ml；bFGF最大顯效濃度為50ng/ml，最小顯效濃

4、度為1ng/ml。PDGF-BB最大最小顯效濃度單獨(dú)作用以及與bFGF聯(lián)合作用的峰值均位于第9天，bFGF單獨(dú)作用峰值位于第6天。酶活性：第3天PDGF-BB作用的細(xì)胞裂解液吸光度峰值位于0.1ng/ml，細(xì)胞培養(yǎng)液吸光度峰值位于1ng/ml。第3天bFGF作用的細(xì)胞裂解液吸光度峰值位于1ng/ml，細(xì)胞培養(yǎng)液吸光度峰值位于10ng/ml。PDGF-BB(10ng/ml)+bFGF(50ng/ml)或PDGF-BB(1ng/ml)+bF

5、GF(1ng/ml)的吸光度值也比對(duì)照組顯著增高，但比PDGF-BB或bFGF對(duì)人PDL細(xì)胞的單獨(dú)作用沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)論：PDGF-BB與bFGF對(duì)人牙周膜細(xì)胞增殖都有明顯的促進(jìn)作用，而且二者聯(lián)合具有協(xié)同作用，在1，3，6，9天內(nèi)呈濃度時(shí)間依賴(lài)關(guān)系；兩種因子對(duì)細(xì)胞酶活性也都有顯著的促進(jìn)作用，但是最大顯效濃度反而在劑量上較小，而且二者聯(lián)合對(duì)酶活性也沒(méi)有明顯協(xié)同作用。這兩種因子對(duì)細(xì)胞增殖與堿性磷酸酶活性?xún)煞矫孀饔媒Y(jié)果不同，這可能