骨髓間質(zhì)干細(xì)胞向肝細(xì)胞定向分化相關(guān)信號分子的分離與解析.pdf

1、干細(xì)胞定向誘導(dǎo)分化是當(dāng)前干細(xì)胞研究領(lǐng)域的一個熱點問題。盡管人們在干細(xì)胞的定向誘導(dǎo)分化方面取得了一定的進(jìn)展，但對體內(nèi)干細(xì)胞激活分化的機(jī)制仍知之甚少。若能深入了解干細(xì)胞在自然狀態(tài)或病理條件下的激活和分化機(jī)制，進(jìn)而模擬體內(nèi)“微環(huán)境”(microenvironment)促使干細(xì)胞向人們期望的方向分化，或許是干細(xì)胞定向誘導(dǎo)分化技術(shù)發(fā)展的一條捷徑。人們在臨床觀察和動物實驗中發(fā)現(xiàn)，肝干細(xì)胞的出現(xiàn)大多發(fā)生在肝臟嚴(yán)重?fù)p傷或慢性肝臟疾病的狀態(tài)下。又有研究表

2、明，骨髓干細(xì)胞可向受損的肝臟遷徙，并具有向肝細(xì)胞橫向分化的可塑性。種種跡象表明，肝臟的損傷似乎是骨髓干細(xì)胞在體內(nèi)橫向分化為肝細(xì)胞的一個重要前提，而肝內(nèi)或肝外干細(xì)胞的激活信號很可能源于損傷的肝臟。我們在前期的研究中通過細(xì)胞交叉移植實驗也發(fā)現(xiàn)，外源性卵圓細(xì)胞在肝臟內(nèi)的特異性定位是受某種“信號分子”的引導(dǎo)所致。這種“信號分子”極可能產(chǎn)生于受損的肝臟，釋于血液循環(huán)，對骨髓干細(xì)胞和肝卵圓細(xì)胞的激活和誘導(dǎo)分化可能起著十分重要的作用?；谝陨贤普摚?/p>

3、們以肝損傷模型大鼠的肝組織萃取物作為誘導(dǎo)刺激物，構(gòu)建了骨髓間質(zhì)干細(xì)胞的體外誘導(dǎo)分化體系，成功實現(xiàn)了由骨髓間質(zhì)干細(xì)胞向肝細(xì)胞的定向分化。在這一實驗體系中，可以實現(xiàn)骨髓間質(zhì)干細(xì)胞由“未決定狀態(tài)”(undetermined)向“決定狀態(tài)”(determined)的轉(zhuǎn)變，促使其向肝細(xì)胞方向分化。該實驗體系不僅清晰地展現(xiàn)了骨髓間質(zhì)干細(xì)胞從早期分化方向的決定到肝細(xì)胞終末分化的各個階段，也進(jìn)一步證明了我們先前的假設(shè)，即，肝干細(xì)胞的激活信號很可能源于損

4、傷的肝臟。然而，損傷狀態(tài)下的肝臟究竟包含了何種“信息分子"?這些"信息分子"和肝臟干細(xì)胞的激活、分化究竟有何種聯(lián)系?若能進(jìn)一步探明這些問題，對于深入理解干細(xì)胞定向分化的機(jī)制無疑具有十分重要的意義。本研究擬采用蛋白質(zhì)芯片飛行時間質(zhì)譜(SELDI-TOF-MS)技術(shù)對肝損傷模型大鼠肝組織萃取物和正常大鼠肝組織萃取物的蛋白質(zhì)表達(dá)譜進(jìn)行比較分析，試圖找出兩者之間存在的差異表達(dá)蛋白，確定與骨髓間質(zhì)干細(xì)胞向肝細(xì)胞定向分化相關(guān)的信號分子，為進(jìn)一步深入