鞘內(nèi)注射糖皮質(zhì)激素對(duì)神經(jīng)病理性疼痛大鼠行為學(xué)及其脊髓水平Akt mRNA表達(dá)的影響.pdf

1、目的: 探討鞘內(nèi)注射糖皮質(zhì)激素對(duì)神經(jīng)病理性疼痛大鼠行為學(xué)及其脊髓水平Akt mRNA表達(dá)的影響
　　 方法: 132只SPF級(jí)雄性Sprague-Dawley大鼠隨機(jī)分為慢性背根神經(jīng)節(jié)壓迫（CCD）組（n=114）和假手術(shù)組（n=18），CCD組進(jìn)一步分成六大組：A組（n=18）、D組（n=18）、C組（n=18）、ET組（n=24）、LT組（n=24）、TT組（n=12）。A組：A4組（制模后3 dAkt抑制劑，4 d取材），

2、A14組（制模后3 d、13 d Akt抑制劑，14 d取材）和A15組（制模后3 d、13 d Akt抑制劑，15 d取材）；D組：D4組（制模后3 d地塞米松，4 d取材），D14組（制模后3 d、13 d 地塞米松，14 d取材）和D15組（制模后3 d、13 d地塞米松，15 d取材）；ET組：(D3V13)14組（制模后3 d地塞米松、13 d 10％DMSO，14 d取材）和(D3V13)15組（制模后3 d地塞米松、13

3、d 10％DMSO，15 d取材）；(DA3V13)14組（制模后3 d地塞米松和Akt抑制劑、13 d 10％DMSO，14 d取材）和(DA3V13)15組（制模后3 d地塞米松和Akt抑制劑、13 d 10％DMSO，15 d取材）；LT組：(V3D13)14組（制模后3 d 10％DMSO、13 d地塞米松，14 d取材）和(V 3 D 13)15組（制模后3 d 10％DMSO、13 d地塞米松，15 d取材）；(V3DA13

4、)14組（制模后3 d 10％DMSO、13 d地塞米松和Akt抑制劑，14 d取材）和(V 3 D A13)15組（制模后3 d 10％DMSO、13 d地塞米松和Akt抑制劑，15 d取材）；TT組： (D3DA13)14組（制模后3 d 地塞米松、13 d地塞米松和Akt抑制劑，14 d取材）和(D3DA13)15組（制模后3 d 地塞米松、13 d地塞米松和Akt抑制劑，15 d取材）；C組：C4組（制模后3 d10％DMSO，

5、4 d取材），C14組（制模后3 d、13 d 10％DMSO，14 d取材）和C15組（制模后3 d、13 d 10％DMSO，15 d取材）。假手術(shù)組進(jìn)一步分成3組：S4（制模后3 d 10％DMSO，4 d取材），S14組（制模后3 d、13 d 10％DMSO，14 d取材）和S15組（制模后3 d、13 d 10％DMSO，15 d取材）。首先自枕骨大孔處行蛛網(wǎng)膜下腔置管，置入微細(xì)導(dǎo)管（PE10）至腰髓平面，5 d后從L4-5

6、椎間孔置入4 mm×4 mm，直徑0.7 mm的鋼棒，完成CCD模型的制作，假手術(shù)組L4-5椎間孔不置入鋼棒。于制模前3 d，制膜后3 d、4 d、7 d、10 d、13 d、14 d、15 d檢測痛行為學(xué)指標(biāo)：機(jī)械痛縮足閾值（PWMT）和熱痛縮足潛伏期（PWTL）。按照分組在相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)處死大鼠，用Real-time PCR的方法檢測脊髓腰膨大及背根節(jié)PKB/Akt水平。
　　 結(jié)果: （1）CCD組和假手術(shù)組大鼠術(shù)前痛行為學(xué)基

7、礎(chǔ)值之間的差別無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；CCD組所有大鼠在制模后1 d都開始出現(xiàn)痛行為學(xué)改變，3 d PWMT降低到（2.67±1.03）g，與假手術(shù)鼠（11.33±2.94）g相比（P<0.05）；隨后1周內(nèi)出現(xiàn)稍回升的趨勢，在第13 d時(shí)PWTL（2.33±0.82）。而sham組術(shù)后3 d PWTL略降低（P＞0.05），隨后逐漸恢復(fù)到基礎(chǔ)值水平。制膜后3 d PWTL降低到（11.82±1.82）g，與假手術(shù)組（22.14±

8、2.34）g相比（P<0.05）；CCD組隨后出現(xiàn)少許回升，第10 d至第13 d CCD組PWTL水平進(jìn)一步下降，至第13 d時(shí)（9.22±1.28）s，與假手術(shù)組（21.31±0.98）s相比，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。（2）于第3 d、13 d測痛行為學(xué)后鞘內(nèi)分別給予地塞米松、地塞米松和Akt抑制劑Ⅳ，第4 d、14 d PWMT明顯上升，鞘內(nèi)給予地塞米松和Akt抑制劑Ⅳ后上升的幅度更明顯（P＜0.05），具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。而L

9、T組鞘內(nèi)給藥后痛行為學(xué)無明顯改變（P＞0.05），與給藥前相比，沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。（3）Real-time PCR 結(jié)果C組與假手術(shù)組術(shù)后第3 d Akt mRNA分別是（3.4±0.56）、（1.01±0.02），（P＜0.05），具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。制模后第3 d 鞘內(nèi)給予10％DMSO，第4 d 脊髓水平Akt mRNA表達(dá)為（2.66±0.33）。制模后第3 d 鞘內(nèi)給予地塞米松或地塞米松和Akt抑制劑Ⅳ后，脊髓水平Akt mRNA表