鞘內(nèi)注射L-NAME對(duì)神經(jīng)病理性疼痛大鼠脊髓背角磷酸化CREB表達(dá)的影響.pdf

1、背景和目的：神經(jīng)病理性疼痛 (Neuropathic Pain) 是神經(jīng)系統(tǒng)損傷引起的一種慢性狀態(tài)。國(guó)際疼痛研究會(huì) (IASP，1994) 將由于外周或中樞神經(jīng)系統(tǒng)直接損傷功能紊亂引起的疼痛稱(chēng)之為神經(jīng)病理性疼痛<'[1]>。目前發(fā)病機(jī)制尚不清楚，近年來(lái)研究認(rèn)為中樞和外周敏化在神經(jīng)病理性疼痛的產(chǎn)生與維持中發(fā)揮著重要作用。而一氧化氮(NO)是20世紀(jì)80年代發(fā)現(xiàn)的一種非經(jīng)典的新型遞質(zhì)和信息傳遞物質(zhì)。目前研究表明，傷害性刺激可引起脊髓背角神經(jīng)

2、元釋放N0，提示N0在脊髓水平主要參與痛覺(jué)敏化的形成與發(fā)展<'[2]>。CREB是一種基本的核轉(zhuǎn)錄因子，當(dāng)其磷酸化后和CREB結(jié)合蛋白(CBP)共同與靶基因上的特定序列CRE結(jié)合，吸引RNA聚合酶Ⅱ組成轉(zhuǎn)錄復(fù)合體，調(diào)節(jié)靶基因的轉(zhuǎn)錄和引起長(zhǎng)時(shí)程適應(yīng)性改變，參與了中樞和外周痛敏的形成和維持<'[3-5]>。本研究擬通過(guò)大鼠鞘內(nèi)預(yù)注射非特異性一氧化氮合酶抑制劑NG-硝基-L-精氨酸-甲基酯(L-NAME)后神經(jīng)性疼痛大鼠脊髓背角磷酸化CAMP

3、反應(yīng)元件結(jié)合蛋白(pCREB)的表達(dá)，擬證實(shí)NO在脊髓水平介導(dǎo)神經(jīng)性疼痛的作用是否與促進(jìn)CREB釋放有關(guān)，探討NO在脊髓水平調(diào)控傷害性信息傳遞的分子機(jī)制。 方法：32只Wistar大鼠(200～300g)隨機(jī)分為4組(n=8)，A組：假手術(shù)組；B組：假手術(shù)前 15min鞘內(nèi)注射L-NAME10 μ l(250 μ g)；C組：CCI模型組；D組：CCI造模前15min鞘內(nèi)注射L-NAME10μ l(250 μg)。各組分別在術(shù)前

4、和術(shù)后3天用熱痛刺激儀測(cè)定各組大鼠術(shù)側(cè)熱刺激回縮潛伏期(PWTL)及基礎(chǔ)值，術(shù)后4天和7天各組隨機(jī)處死4只大鼠，取大鼠L4-5脊髓段進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色，對(duì)脊髓背角PCREB染色陽(yáng)性神經(jīng)元進(jìn)行記數(shù)分析。 結(jié)果：第一部分，術(shù)后4天與7天4組免疫組化分析結(jié)果比較：C組脊髓背角PCREB表達(dá)最強(qiáng)，與其他三組比較明顯增強(qiáng)(P<0.05)。第二部分，各組術(shù)后3天閾值與術(shù)前基礎(chǔ)值比較均有不同程度減少(P<0.05)，術(shù)后3天C組與其他三組比