大鼠鞘內(nèi)阿米洛利治療神經(jīng)病理性疼痛的機(jī)制研究.pdf

1、[目的]神經(jīng)病理性疼痛最顯著的特征是受損傷組織修復(fù)之后疼痛仍然持續(xù)存在，其機(jī)制目前尚不清楚，臨床上尚無(wú)確切、有效的治療方法。早于1998年，Zeng等報(bào)道過(guò)阿米洛利有抗傷害作用，但具體機(jī)制尚不完全清楚。多項(xiàng)研究證實(shí)脊髓背角神經(jīng)元和小膠質(zhì)細(xì)胞的激活在神經(jīng)病理性疼痛發(fā)生和發(fā)展中發(fā)揮著重要作用。本研究欲采用大鼠L5脊神經(jīng)結(jié)扎神經(jīng)病理性疼痛大鼠模型，應(yīng)用鞘內(nèi)置管給藥的方法，探討鞘內(nèi)阿米洛利治療神經(jīng)病理性疼痛與Fos蛋白、p38MAPK在脊髓背角

2、神經(jīng)元、小膠質(zhì)細(xì)胞內(nèi)表達(dá)的關(guān)系。 [方法]健康雄性SD大鼠，250-300g，鞘內(nèi)留置PE-10導(dǎo)管，一周后制作大鼠L5脊神經(jīng)結(jié)扎神經(jīng)病理性疼痛模型(SNL)。將大鼠隨機(jī)分為5組，每組6只：對(duì)照組(saline20μl)，阿米洛利組(amiloride12.5、25、50、100μg)。測(cè)定各組鞘內(nèi)給藥前、給藥后15、30、45、60、75、90、105、120min各時(shí)點(diǎn)的大鼠機(jī)械撤足閾值，計(jì)算對(duì)應(yīng)時(shí)點(diǎn)的最大效應(yīng)百分比(％MP

3、E)，評(píng)價(jià)抗神經(jīng)病理性疼痛效能。隨后將對(duì)照組與阿米洛利100μg組的大鼠分別進(jìn)行脊髓Fos蛋白和磷酸化p38 MAPK的免疫組織化學(xué)來(lái)觀察其在脊髓背角淺層的表達(dá)變化情況。 [結(jié)果]鞘內(nèi)注射阿米洛利12.5μg、25μg后沒(méi)有產(chǎn)生明顯的抗神經(jīng)病理性疼痛作用(P＞0.05)。而鞘內(nèi)注射50μg及100μg阿米洛利后15min即產(chǎn)生明顯抗神經(jīng)病理性疼痛的作用(P<0.01)，前一劑量抗神經(jīng)病理性疼痛的作用可持續(xù)75min，而后一劑量在

4、注藥后60min達(dá)到最大的抗神經(jīng)病理性疼痛作用，并能持續(xù)到給藥后120min。 免疫組織化學(xué)結(jié)果顯示：與生理鹽水組比較，鞘內(nèi)給予阿米洛利100μg可以明顯抑制手術(shù)同側(cè)脊髓背角淺層Fos蛋白和磷酸化p38 MAPK的表達(dá)(P<0.01)，而手術(shù)對(duì)側(cè)脊髓背角淺層的蛋白表達(dá)量比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 鞘內(nèi)注射阿米洛利12.5-100μg后，大鼠并無(wú)異常行為。 [結(jié)論]大鼠鞘內(nèi)注射阿米洛利可以產(chǎn)生明顯的劑量依賴性和時(shí)間依賴性抗