控制性低中心靜脈壓對(duì)兔肝缺血再灌注損傷的肝腎保護(hù)實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：比較控制性低中心靜脈壓(controlled low central venouspressure,CLCVP)在生理和肝缺血再灌注損傷(ischemia reperfusioninjury,IRI)狀態(tài)下酸堿平衡、凝血功能及肝腎血流和功能的變化,揭示CLCVP對(duì)肝腎灌注的影響。
　　 方法：健康成年新西蘭大白兔32只,雌雄不拘,體重2.02±0.07kg,隨機(jī)分為4組(各組n=8):對(duì)照組(C組)、單純CLCVP組(L組

2、)、肝IRI組(IR組)和CLCVP下肝IRI組(LIR組)。各組動(dòng)物均經(jīng)耳緣靜脈注射3％戊巴比妥鈉30 mg/kg麻醉,仰臥固定。氣管切開插管機(jī)械通氣,左頸總動(dòng)脈監(jiān)測血壓,右頸內(nèi)靜脈監(jiān)測中心靜脈壓(central venous pressure,CVP)。L組和LIR組經(jīng)右股靜脈微量泵入硝酸甘油10～30μg·kg-1·min-1(3.6 mg/ml)、多巴胺30～40μg·kg-1·min-1(4.8mg/ml),在5 min內(nèi)使C

3、VP降至4～5 cmH2O,并控制平均動(dòng)脈壓(meanarterial blood pressure,MAP)≥80 mmHg建立CLCVP模型。C組和IR組靜脈泵入等量生理鹽水。然后IR組和LIR組建立IRI模型:兔右肋下1.5cm處行橫切口進(jìn)腹,分離第一肝門,用無創(chuàng)動(dòng)脈夾夾閉門靜脈、肝動(dòng)脈和膽總管,0.5 h后開放肝門再灌注。又于麻醉后5 min(T0)、CLCVP模型建立成功(肝門開放)即刻(T1)、0.5 h(T2)、1h(T3

4、)、2 h(T4)、4 h(T5)、6 h(T6)時(shí)點(diǎn),彩色超聲監(jiān)測各組肝腎血管內(nèi)徑、動(dòng)脈收縮期峰值流速(peak systolic blood flow velocity,Vs)、舒張末期流速(end diastolic blood flow velocity,Ved)、平均血流速度(mean-envelped blood flow velocity,Vm)、阻力指數(shù)(resistance index,RI)、搏動(dòng)指數(shù)(pulsati

5、lity index,PI)以及靜脈血流速度,采集動(dòng)脈血檢測血?dú)夥治?、乳?lactic acid,LD)、凝血酶原時(shí)間(prothrombin time,PT)、活化部分凝血活酶時(shí)間(activated partial thromboplastin time,APTT)、谷丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(alanine transaminase,ALT)、門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(aspartate transaminase,AST)、肌酐(creati

6、nilie,Cr),并在T6時(shí)點(diǎn)測定尿量。電鏡觀察肝腎組織超微結(jié)構(gòu)變化。
　　 結(jié)果：(1)血?dú)夥治龊湍δ?與C組比,L組各時(shí)點(diǎn)血?dú)夥治?、LD、PT、APTT差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),IR組和LIR組T2～5時(shí)點(diǎn)pH降低(P<0.05),IR組和LIR組T1～6時(shí)點(diǎn)LD增高(P<0.05)。LIR組T1～5時(shí)點(diǎn)LD較IR組降低(P<0.05)。與C組比,IR組T1～6時(shí)點(diǎn)和LIR組T3～5時(shí)點(diǎn)PT延長,兩組T1～6時(shí)

7、點(diǎn)APTT延長(P<0.05)。LIR組T1～6時(shí)點(diǎn)PT和T1～5時(shí)點(diǎn)APTT較IR組縮短(P<0.05)。(2)肝灌注和肝功能:與C組比,L組各時(shí)點(diǎn)肝血管內(nèi)徑、血流速度、ALT、AST差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),IR組和LIR組各時(shí)點(diǎn)肝血管內(nèi)徑、肝門靜脈血流速度差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。IR組T1～6時(shí)點(diǎn)和LIR組T2～4,6時(shí)點(diǎn)肝動(dòng)脈Vm較C組減慢(P<0.05)；LIR組T1～2,5時(shí)點(diǎn)較IR組增快,且T3時(shí)點(diǎn)較T1

8、時(shí)點(diǎn)減慢(P<0.05)。IR組T1～5時(shí)點(diǎn)和LIR組T1～2時(shí)點(diǎn)肝動(dòng)脈RI和PI較C組升高(P<0.05)；LIR組T1,3～時(shí)點(diǎn)肝動(dòng)脈RI和PI較IR組降低(P<0.05)。LIR組T1～6時(shí)點(diǎn)肝靜脈流速較C組和IR組增快(P<0.05)。IR組和LIR組T1～6時(shí)點(diǎn)ALT、AST較C組增高(P<0.05)；LIR組T1,4～6時(shí)點(diǎn)ALT較IR組降低,且T2～5時(shí)點(diǎn)較T1時(shí)點(diǎn)增高；LIR組T1～6時(shí)點(diǎn)AST較IR組降低,其中T3～4

9、時(shí)點(diǎn)較T1時(shí)點(diǎn)增高(P<0.05)。(3)腎灌注和腎功能:與C組比,L組各時(shí)點(diǎn)腎血管內(nèi)徑、血流速度、Cr差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,IR組和LIR組各時(shí)點(diǎn)腎動(dòng)脈內(nèi)徑差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。IR組T1～4時(shí)點(diǎn)腎動(dòng)脈Vm較C組減慢(P<0.05)；LAR組T1～4時(shí)點(diǎn)腎動(dòng)脈Vm較IR組增快(P<0.05)。IR組T1～4時(shí)點(diǎn)和LIR組T4時(shí)點(diǎn)腎動(dòng)脈RI較C組升高(P<0.05)；IAR組T2時(shí)點(diǎn)腎動(dòng)脈RI較IR組降低(P<0.05)。IR組

10、T1～4時(shí)點(diǎn)腎靜脈流速較C組減慢,LIR組T1～4時(shí)點(diǎn)腎靜脈流速較IR組增快(P<0.05)。IR組T1～6時(shí)點(diǎn)Cr較C組增高(P<0.05)；LIR組T1～6時(shí)點(diǎn)Cr較IR組降低,其中T4～5時(shí)點(diǎn)較T1時(shí)點(diǎn)增高(P<0.05)。IR組和LIR組尿量較C組減少,LIR組較IR組增加(P<0.05)。(4)肝腎組織超微結(jié)構(gòu):IR組肝細(xì)胞線粒體明顯腫脹、嵴斷裂,滑面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)增生明顯,竇周間隙面微絨毛明顯腫脹,部分呈空泡狀,有脫落入肝血竇腔內(nèi),

11、肝血竇內(nèi)皮細(xì)胞腫脹壞死,竇壁破壞明顯,肝血竇腔內(nèi)可見中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞浸潤；腎小球毛細(xì)血管擴(kuò)大,足細(xì)胞足突有不同程度的融合或消失。LIR組肝細(xì)胞線粒體稍有腫脹,無嵴斷裂,滑面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)增生,竇周間隙面微絨毛稍有腫脹,肝血竇內(nèi)皮細(xì)胞稍有腫脹,竇壁覆蓋完整；腎小球毛細(xì)血管稍有擴(kuò)大,未見足突融合。
　　 結(jié)論：(1)在生理狀態(tài)下CLCVP在6 h內(nèi)對(duì)機(jī)體酸堿平衡、凝血功能以及肝腎功能無明顯影響。(2)肝IRI可導(dǎo)致機(jī)體代謝性酸中毒、凝血