慢性不可預見性應(yīng)激對缺血性卒中大鼠海馬的Notch信號通路功能的影響及氟西汀干預研究.pdf

1、研究背景及目的： Notch信號通路作為抑制性信號轉(zhuǎn)導途徑，在決定神經(jīng)前體細胞（neural precursor cells，NPCs）的增殖和分化方向上發(fā)揮著關(guān)鍵的作用。最新研究提示缺血性卒中后大鼠海馬區(qū)Notch信號系統(tǒng)的表達變化，可能參與了卒中后海馬神經(jīng)再生的調(diào)節(jié)。慢性不可預見性溫和應(yīng)激（chronic unpredictable mild stress，CUMS）可導致抑郁的發(fā)生，抑制海馬神經(jīng)再生。本研究探討了卒中后應(yīng)激對海馬神

2、經(jīng)再生及其可能的調(diào)控機制-Notch信號系統(tǒng)的影響，以及給予抗抑郁藥物氟西汀干預后的變化。
　　 方法：在SD雄性大鼠MCAO局灶性缺血模型的基礎(chǔ)上，給予18天的CUMS流程處理，建立卒中后抑郁（post-stroke depression，PSD）動物模型，并分為假手術(shù)組（Sham）、卒中組（MCAO）、卒中后抑郁組（MCAO+CUMS）以及氟西汀藥物干預組（MCAO+CUMS+Flu）。采用糖水試驗、敞箱試驗及強迫游泳試驗進

3、行實驗動物抑郁癥狀的行為學評估。分別在MCAO術(shù)后19天和28天時，采用BrdU+免疫組織化學染色及BrdU+/NeuN+、BrdU+/GFAP+免疫熒光雙標染色方法，比較不同組間、不同時間點時海馬齒狀回NPCs的增殖及向神經(jīng)元、星形膠質(zhì)細胞分化的變化；并采用western blotting、real time RT-PCR的方法，測定各組不同時間點的Notch1、及其配體Jagged1、下游靶點Hes1、Hes5的蛋白、mRNA表達。

4、
　　 結(jié)果：較之于MCAO大鼠，給予CUMS處理的MCAO大鼠在術(shù)后19天出現(xiàn)抑郁癥狀的行為學改變，海馬齒狀回NPCs的增殖減少（P<0.01），Hes1、Hes5的蛋白、mRNA表達降低（均P<0.05）。MCAO術(shù)后28天時，CUMS導致MCAO大鼠海馬齒狀回顆粒下層（SGZ）新生NPCs向神經(jīng)元方向的分化減少（P<0.01），而齒狀回門區(qū)的新生NPCs向星形膠質(zhì)細胞方向的分化增多（P<0.05），同期的Hes1、Hes5

5、的蛋白、基因表達增加（均P<0.05）。而CUMS+MCAO組的Notch1的蛋白、mRNA表達在MCAO術(shù)后19天和28天時，與MCAO組相比較均顯著下降（P<0.05），其配體Jagged1的蛋白、mRNA表達在MCAO術(shù)后19天時與MCAO組相比較無顯著差異（P>0.05），但在MCAO術(shù)后28天是顯著增加（P<0.05）。氟西汀的干預可逆轉(zhuǎn)CUMS對MCAO大鼠海馬神經(jīng)再生及Notch系統(tǒng)活性的影響。
　　 結(jié)論： No