丁苯酞?jiǎng)訂T內(nèi)皮祖細(xì)胞治療缺血性卒中大鼠的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:觀察不同劑量丁苯酞對(duì)大腦中動(dòng)脈缺血(MCAO)/再灌注模型大鼠神經(jīng)功能、循環(huán)內(nèi)皮祖細(xì)胞(circulating endothelial progenitor cells,EPCs)水平及梗死區(qū)血管新生的影響,探討其治療缺血性卒中的療效及機(jī)制。
　　方法:選取健康雄性大鼠Sprague-Dawley(SD)大鼠48只,體重(250±20)g,按照隨機(jī)分組法分為假手術(shù)組,模型對(duì)照組,NBP低劑量治療組(60mg/kg.d)和NB

2、P高劑量治療組(120mg/kg.d),每組各12只。假手術(shù)組僅分離頸部血管而不插入線栓。其他三組均采用線栓法建立大鼠MCAO/再灌注模型,假手術(shù)組與模型組各取2只行TTC染色法觀察大鼠梗塞區(qū)形態(tài)學(xué)改變,其余大鼠分別給予安慰劑(大豆油)(2ml/d)及兩種劑量的NBP灌胃治療,持續(xù)5d。每天對(duì)四組大鼠進(jìn)行神經(jīng)功能缺損評(píng)分;給藥前及灌胃5d后分兩次采集大鼠外周血,流式細(xì)胞儀檢測(cè)治療前后循環(huán)EPCs的數(shù)量;灌胃5d后行血管內(nèi)皮細(xì)胞標(biāo)記物CD

3、31及vWF免疫組化染色,觀察各組大鼠缺血區(qū)血管新生情況。GraphPad5.0軟件系統(tǒng)對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析處理。
　　結(jié)果:
　　1)腦TTC染色后可見(jiàn)線栓側(cè)大腦半球明顯梗死病灶,呈蒼白色,非梗死區(qū)顯示為紅色;
　　2)NBP治療第1d,低劑量組大鼠神經(jīng)功能評(píng)分開始出現(xiàn)降低(P<0.05),高劑量組神經(jīng)功能評(píng)分明顯降低(P<0.01),模型對(duì)照組大鼠神經(jīng)功能評(píng)分在灌胃3d后出現(xiàn)明顯降低(P<0.01);
　　

4、3)NBP治療第1d,低劑量組大鼠神經(jīng)功能評(píng)分低于對(duì)照組(P<0.05),高劑量組神經(jīng)功能評(píng)分明顯低于對(duì)照組(P<0.01);第2-5d,NBP兩種劑量治療組大鼠神經(jīng)功能評(píng)分均顯著低于對(duì)照組(P<0.01);
　　4)NBP治療第3d,高劑量組神經(jīng)功能評(píng)分明顯低于低劑量組(P<0.01);
　　5)灌胃5d后與缺血2h再灌注時(shí)比較,假手術(shù)組大鼠外周血EPCs數(shù)量無(wú)明顯變化,其余各組均顯著增加(P<0.01);
　　6)

5、不同劑量NBP治療組大鼠在5d后的外周血EPCs數(shù)量均顯著高于對(duì)照組(P<0.01);NBP高劑量組外周血EPCs水平顯著高于低劑量組(P<0.01);
　　7)假手術(shù)組腦切片顯微鏡下可見(jiàn)抗CD31陽(yáng)性細(xì)胞和抗vWF陽(yáng)性細(xì)胞,呈正常腦組織內(nèi)血管染色;對(duì)照組腦切片幾乎未見(jiàn)或極少量表達(dá)抗CD31陽(yáng)性或抗vWF陽(yáng)性細(xì)胞,提示腦缺血區(qū)血管破壞;NBP治療組腦切片在光鏡下均可看到抗CD31陽(yáng)性及抗vWF陽(yáng)性細(xì)胞大量表達(dá),其中NBP高劑量治療