內(nèi)脂素通過PI3K-AKT-GSK信號通路對KKAy糖尿病小鼠骨骼肌糖代謝的影響.pdf

1、目的：觀察內(nèi)脂素對KKAy糖尿病小鼠骨骼肌組織PI3K（磷酯酰肌醇3激酶）、蛋白激酶B（Akt）、糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)、葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白-4（GLUT-4）的影響,探討內(nèi)脂素在骨骼肌PI3K/Akt/GSK/GLUT-4信號通路中的作用及其可能的降糖機制。方法：C57BL/6J小鼠隨機分為空白對照組（CON）、高脂喂養(yǎng)組（HFD），KKAy糖尿病小鼠予以高脂飼料喂養(yǎng)，隨機分為4組：糖尿病模型組(DM)、visfatin治療

2、組(V)、visfatin+LY294002聯(lián)合組(V+LY)、LY294002組(LY)，兩次空腹血糖均≥13.9mmol/L為糖尿病成模，成模后2周，visfatin組腹腔注射內(nèi)脂素重組蛋白，visfatin+LY294002聯(lián)合組腹腔注射內(nèi)脂素重組蛋白及LY294002，LY294002組腹腔注射LY294002；測定各組空腹血糖(FBG)、空腹胰島素(FINS)、總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C

3、)及低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)；計算穩(wěn)態(tài)模型胰島素抵抗指數(shù)（HOMA-IR）及胰島素敏感指數(shù)（ISI）。采用RT-PCR方法測定各組小鼠骨骼肌組織中PI3K、AKT、GLUT-4 mRNA表達，western blot測定各組小鼠骨骼肌組織中PI3K、AKT、P-AKT、GSK-3β、P-GSK-3β、GLUT-4蛋白表達。結(jié)果：高脂組FINS、TC、LDL-C和HOMA-IR較空白組顯著升高（P<0.05)；糖尿病小鼠FBG、F

4、INS、TG、TC、LDL-C和HOMA-IR水平均較高脂組顯著升高（P<0.05)，內(nèi)脂素治療組FBG、TG、TC、LDL-C較模型組顯著降低（P<0.05)。與空白組比較，高脂組AKT mRNA表達量明顯降低(P<0.05)，與高脂組比，糖尿病組PI3K、AKT mRNA、GLUT-4表達量均顯著降低；與糖尿病組比較，內(nèi)脂素組PI3K、AKT、GLUT-4 mRNA表達量均明顯增加(P<0.05)。與內(nèi)脂素比較，聯(lián)合組PI3K、AK

5、T、GLUT-4 mRNA表達量均明顯增加(P<0.05)，與聯(lián)合組比較，抑制劑組PI3K、AKT、GLUT-4 mRNA表達量均明顯降低(P<0.05)。
　　與空白組比較，高脂組GLUT-4蛋白表達量明顯降低；與高脂組比較，糖尿病組PI3K、GLUT-4蛋白表達量均明顯降低、AKT蛋白表達量及其磷酸化水平均明顯降低、GSK-3β蛋白表達量明顯增高而其磷酸化水平明顯降低(P＜0.05)；與模型組比較，內(nèi)脂素組PI3K、GLUT-

6、4蛋白表達量均明顯增加、AKT磷酸化表達量明顯升高、GSK-3β蛋白表達量降低且其磷酸化水平明顯升高（P＜0.05）。與內(nèi)脂素組比較，聯(lián)合組、抑制劑組PI3K、GLUT-4蛋白表達量、AKT、 GSK-3β磷酸化均明顯降低，但GSK-3β蛋白表達量明顯升高（P＜0.05）。與聯(lián)合組比較，抑制劑組GLUT-4蛋白表達量明顯降低（P＜0.01）。
　　結(jié)論：內(nèi)脂素通過調(diào)節(jié)骨骼肌P13K/Akt/GSK/GLUT-4通路活性，從而改善K