精氨酸酶在蛛網(wǎng)膜下腔出血后所致腦血管痙攣中作用的研究.pdf

1、目的:
　　前期腦血管蛋白組學研究表明，精氨酸酶（Arginase）是蛛網(wǎng)膜下腔出血(SAH)后腦血管中35種高表達的差異蛋白之一。Arginase與重要的血管活性物質(zhì)NO間關系密切，我們推測Arginase可能在SAH后腦血管痙攣(CVS)的病理過程中發(fā)揮作用。本實驗研究Arginase在SAH后CVS中的表達變化，并觀察應用其抑制劑對SAH后CVS的作用，為防治CVS尋找新的途徑。
　　方法:
　　1.建立兔二次蛛

2、網(wǎng)膜下腔出血模型（CVS模型）:按照不同時相分組，在建立模型前及建立模型后的3d、5d、7d、14d行DSA造影，比較各時相基底動脈直徑的變化。
　　2.Western blotting檢測正常組及建立模型后基底動脈Arginase蛋白表達的變化:正常兔及在建立模型3d、5d、7d、14d后，Western blotting分別測定蛋白表達水平，并分析建立模型后不同時相基底動脈直徑的變化與Arginase不同時相表達的變化是否有相

3、關性。
　　3.處理組實驗:分正常組、SAH組、Arginase抑制劑組、溶媒組4組。建立二次蛛網(wǎng)膜下腔出血模型后30min經(jīng)腦池途徑分別行藥物、生理鹽水及溶媒處理。在建立模型前及建立模型后7d分別行DSA造影，比較前后兩次造影基底動脈直徑的變化，及Western blotting測定Arginase蛋白表達水平的變化。
　　結(jié)果:
　　1.建立兔二次SAH后CVS模型。DSA造影顯示與正常相比，注血后3d、5d、7d

4、、14d均出現(xiàn)不同程度的血管狹窄，分別為正常的76.0％±8.0％(P＜0.01)、78.2％±10.4％(P＜0.01)、66.7％±12.8％(P＜0.01)、84.7％±8.6％(P＜0.05),7d時達高峰，14d時較前緩解。
　　2.Arginase蛋白表達在建立模型后3d、5d、7d、14d均升高，分別為80.6±4.1％、86.2±6.7％、88.4±7.1％、36.5±9.9％，與正常組對比(P＜0.05)，其中7

5、d時為高峰。Arginase表達的時相性變化與建立腦血管痙攣模型后基底動脈直徑的時相性變化的相關系數(shù)為0.956，二者的時相性變化存在直線關系。
　　3.處理組實驗:Arginase抑制劑處理組的基底動脈直徑與第0天相比顯示無顯著差別（93.2％±6.4％，與SAH組比較P＜0.01）;溶媒組的基底動脈直徑與第0天相比顯示狹窄（66.7％±11.8％，與正常組比較P＜0.05）;溶媒處理組上述指標與SAH組無明顯差異。Argina

6、se抑制劑組的Arginase蛋白表達處于低水平，與SAH組比較顯著降低（24.7％±5.4％，P＜0.01）;溶媒組的Arginase蛋白表達呈高水平，與SAH組比較無顯著變化（63.1％±13.6％，P＞0.05）。
　　結(jié)論:
　　1.結(jié)果提示Arginase參與了SAH后CVS的發(fā)生發(fā)展;
　　2.特異性抑制Arginase的表達，能有效緩解SAH后腦血管痙攣;
　　3.Arginase可能是治療腦血管痙