異硫氰酸苯己酯(PHI)對HL-60細胞PI3K-Akt信號轉(zhuǎn)導通路影響的實驗研究.pdf

1、目的：研究異硫氰酸苯己酯(PHI)對HL-60細胞株增殖、凋亡的作用，及對HL-60細胞PI3K/Akt信號轉(zhuǎn)導通路的影響，與經(jīng)典的PI3K/Akt信號轉(zhuǎn)導通路抑制劑LY294002聯(lián)合用藥，探討PHI影響PI3K/Akt信號轉(zhuǎn)導通路的可能機制。
　　方法：采用MTT方法繪制PHI和/或LY294002作用于HL-60細胞后的生長曲線；采用使用Annexin V/PI雙染試劑盒經(jīng)流式細胞儀定量檢測細胞凋亡的變化；用蛋白免疫印跡法（

2、Western Blot）檢測HL-60細胞組蛋白乙酰化H3、H4水平及PI3K/Akt信號轉(zhuǎn)導通路蛋白表達水平的變化。
　　結(jié)果：（1）PHI和LY294002都能抑制HL-60細胞增殖并能誘導HL-60細胞凋亡，隨作用時間延長及濃度的增加，凋亡率逐漸上升，呈時效及量效關(guān)系，聯(lián)合用藥后變化更加明顯；（2）PHI處理HL-60細胞7小時可見HL-60細胞組蛋白H3、H4乙?；撸鳯Y294002處理后組蛋白乙?；疕3、H4水平

3、未見發(fā)生明顯改變；PHI加LY294002聯(lián)合用藥較 PHI單獨用藥組更能上調(diào)組蛋白H3、H4乙?；?。(3)PHI和LY294002均能下調(diào)HL-60細胞PI3K/Akt信號通路p-AKT、p-mTOR、p-P70S6K水平，呈時效及量效變化；聯(lián)合用藥組抑制作用更加明顯。
　　結(jié)論：PHI和LY294002都可抑制PI3K/Akt信號通路，抑制HL-60細胞的增殖、誘導細胞凋亡。PHI可上調(diào)組蛋白H3、H4乙?；剑琇Y2940