藤三七葉提取物對高果糖誘發(fā)的小鼠胰島素抵抗的影響及機制探討.pdf

1、目的:本研究旨在通過高果糖飼料誘發(fā)ICR小鼠胰島素抵抗，觀察藤三七葉類黃酮和皂甙提取物對小鼠胰島素抵抗的影響，并探討藤三七葉提取物的降糖機制。
　　方法:72只雄性ICR小鼠購于大連醫(yī)科大學實驗動物中心，隨機分為6組，即對照組、模型組，低劑量類黃酮組、高劑量類黃酮組，低劑量皂甙組和高劑量皂甙組，每組12只。對照組小鼠食用正常飼料和飲用水;模型組小鼠食用60％果糖飼料和正常飲用水;低劑量類黃酮組小鼠食用60％果糖飼料和1％藤三七葉類

2、黃酮提取物飲液;高劑量類黃酮組小鼠食用60％果糖飼料和2％藤三七葉類黃酮提取物飲液;低劑量皂甙組小鼠食用60％果糖飼料和1％藤三七葉皂甙提取物飲液;高劑量皂甙組小鼠食用60％果糖飼料和2％藤三七葉皂甙提取物飲液。在第19周時進行口服葡萄糖耐量試驗(OGTT)，小鼠禁食12小時后，分別在0，30，60和120min時間點尾部靜脈取血，測試血糖濃度。第20周，小鼠稱重后，經(jīng)眼部穿刺取血獲取血清，頸椎脫臼法處死后，解剖獲得肝組織并稱重。通過小

3、鼠體重和肝臟重量，計算小鼠肝臟臟器系數(shù)，評價小鼠肝臟的損傷狀況;應用自動生化分析儀檢測小鼠空腹血清中葡萄糖、甘油三酯、總膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇和高密度脂蛋白膽固醇的濃度;采用Western Blot免疫印記技術，檢測各組小鼠肝臟組織PPARγ蛋白的相對表達水平;采用實時熒光相對定量RT-PCR(qRT-PCR)技術，檢測各組小鼠肝組織中PPARγ基因的相對表達水平;小鼠肝臟組織經(jīng)HE染色后，在鏡下觀察各組小鼠肝臟的病理改變。實驗結果

4、用SPSS17.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計分析。
　　結果:小鼠肝臟臟器系數(shù)結果顯示，模型組與對照組比較，小鼠肝臟發(fā)生了明顯的損傷，差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）;低劑量類黃酮組、高劑量類黃酮組和模型組比較，小鼠肝臟臟器系數(shù)均無顯著性差異（P＞0.05）;高劑量皂甙組與模型組比較，小鼠肝臟損傷得到明顯改善，差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。葡萄糖耐量實驗結果顯示，模型組與對照組比較，小鼠糖耐量明顯發(fā)生異常，差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0

5、.05);低劑量類黃酮組和高劑量類黃酮組與模型組比較，小鼠糖耐量差異均無統(tǒng)計學意義(P＞0.05);低劑量皂甙組和高劑量皂甙組與模型組比較，明顯改善小鼠糖耐量異常，差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，且呈劑量-效應關系。模型組與對照組比較，小鼠空腹血清中葡萄糖、胰島素、甘油三酯、總膽固醇、和低密度脂蛋白膽固醇的濃度明顯升高，高密度脂蛋白膽固醇濃度下降，差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05);低劑量類黃酮組和高劑量類黃酮組與模型組比較，差異無

6、統(tǒng)計學意義(P＞0.05);低劑量皂甙組和高劑量皂甙組與模型組比較，差異具有顯著性差異（P＜0.05），且呈劑量-效應關系。qRT-PCR檢測結果顯示，模型組與對照組比較，小鼠肝臟組織PPARγ mRNA表達顯著降低，差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）;低劑量類黃酮組和高劑量類黃酮組與模型組比較均無統(tǒng)計學意義(P＞0.05);低劑量皂甙組和高劑量皂甙組與模型組比較，PPARγ mRNA的表達顯著增高，差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），

7、且呈劑量-效應關系。Western Blot檢測結果顯示，模型組與對照組比較，小鼠肝臟組織PPARγ蛋白表達顯著降低，差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）;低劑量類黃酮組和高劑量類黃酮組與模型組比較均無統(tǒng)計學意義(P＞0.05);低劑量皂甙組和高劑量皂甙組與模型組比較，小鼠PPARγ蛋白的表達顯著增高，差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，且呈劑量-效應關系。HE染色后，鏡下觀察，對照組小鼠肝細胞狀態(tài)良好，肝組織結構清晰可見，未見明顯病理改