保肝寧抗肝纖維化作用的實驗研究.pdf

1、目的:探討保肝寧抗肝纖維化的作用及其相關(guān)機(jī)理.方法:分體內(nèi)和體外實驗兩部分進(jìn)行研究.體內(nèi)實驗部分,采用經(jīng)典的CCl<,4>中毒性大鼠肝纖維化模型,主要測定以下兩方面的指標(biāo)以探討其作用機(jī)理:肝臟損傷程度(血清轉(zhuǎn)氨酶水平、肝組織切片HE染色觀察和病理學(xué)分級)和肝纖維化程度(血清HA、LN、PⅢP、Ⅳ型膠原水平,肝組織Masson染色).體外實驗部分,按Seglen的改良原位二步膠原酶灌注法分離大鼠肝細(xì)胞,用H<,2>O<,2>和CCl<,4

2、>兩種損傷方法制作急性肝細(xì)胞損傷模型,觀察肝細(xì)胞懸液和培養(yǎng)上清中ALT、SOD、MDA、NO等指標(biāo).為進(jìn)一步揭示保肝寧作用機(jī)理,觀察H<,2>O<,2>損傷肝細(xì)胞后肝細(xì)胞核轉(zhuǎn)錄因子NF-κB的變化情況,并對肝星狀細(xì)胞增殖和Ⅰ型膠原分泌的影響進(jìn)行了初步研究.結(jié)果:體內(nèi)實驗部分,保肝寧可以降低ALT、MDA、HA、LN等水平,升高SOD活性,Masson染色示可以減少肝臟內(nèi)膠原產(chǎn)生.體外實驗部分,保肝寧可以顯著降低肝細(xì)胞懸液和培養(yǎng)上清中AL