沙丁胺醇在肉牛體內(nèi)代謝殘留規(guī)律研究.pdf

1、本研究通過給牛飼喂沙丁胺醇（SAL），研究其在肉牛血漿、尿液、毛發(fā)中的殘留、消除規(guī)律及在肝臟、腎臟、心臟、眼、肌肉、肺臟等組織器官中的分布規(guī)律，旨在為監(jiān)管 SAL在肉牛生產(chǎn)環(huán)節(jié)非法使用提供可靠靶標(biāo)，研究包括以下三個部分：
　　試驗(yàn)一：選取3頭體況良好，平均體重516.7±21.9 kg，黑白花荷斯坦青年牛，單次飼喂0.15 mg/kg BW的SAL。采集給藥后的血漿，尿液，黑、白毛發(fā)樣品，采用UPLC-MS/MS法測定其中SAL濃

2、度。結(jié)果顯示，酶解后血漿、尿液中SAL濃度顯著高于酶解前（P<0.01）；給藥后12 h，SAL在血漿中達(dá)到峰值（酶解前0.3 ng/mL，酶解后32.6 ng/mL）；酶解前、后尿液中SAL濃度分別在給藥后0、1 d達(dá)到峰值（50.2 ng/mL和3582.1 ng/mL）；血漿和尿液中SAL濃度分別在給藥后2、5 d低于定量限（LOQ分別為0.2 ng/mL和0.3 ng/mL）；單次給藥1 d后，SAL可在牛黑、白毛發(fā)中檢測出，分

3、別為1.7、1.0 ng/g。結(jié)果表明，SAL在血漿和尿液中消除迅速，且主要以其軛合物形式存在。
　　試驗(yàn)二：選取6頭體況發(fā)育良好，平均體重311±26.05 kg，毛色為紅白花的中國西門塔爾雜交肉牛，隨機(jī)分為2個不同的劑量組，每組3個重復(fù)，分別飼喂0.15、0.45 mg/kg BW/d的SAL，給藥期21 d，停藥期70 d。分別采集給藥期和停藥期肉牛血漿，尿液，紅、白毛發(fā)樣品，使用UPLC-MS/MS法測定其中SAL濃度，并

4、應(yīng)用UHPLC-Q-TOF MS對血漿、尿液中SAL代謝物進(jìn)行鑒定。結(jié)果顯示：（1）高、低劑量組血漿中 SAL殘留消除規(guī)律相似，隨著給藥期延長，SAL在肉牛血漿中并不存在時間累積效應(yīng)，停藥后血漿中SAL迅速消除，停藥14 d時均低于檢測限；酶解后血漿中SAL濃度顯著高于酶解前（P<0.0001），SAL在血漿中除原藥外，還有2種代謝物，主要以代謝物形式存在；（2）不同于血漿，SAL在肉牛高、低劑量組尿液中的濃度隨著給藥期延長而逐漸累積，

5、給藥21 d時達(dá)到峰值（2444.4 ng/mL和1654.4 ng/mL），停藥后迅速消除，停藥28 d時已低于定量限（LOQ=0.3 ng/mL）；酶解后尿液中SAL濃度顯著高于酶解前（P=0.0056），SAL在尿液中除原藥形式外，還存在6種代謝物；（3）肉牛毛發(fā)中的SAL濃度隨著給藥時間延長而逐漸累積，高、低劑量組紅色毛發(fā)分別在給藥第14 d和給藥第21 d達(dá)到峰值（325.7 ng/g和442.5 ng/g），高、低劑量組白色

6、毛發(fā)分別在停藥第14 d達(dá)到峰值（160.9 ng/g和33.8 ng/g），隨后毛發(fā)中SAL緩慢消除，停藥70 d時紅、白毛發(fā)中均能檢測到SAL殘留；而且，紅色毛發(fā)中SAL濃度顯著高于白色毛發(fā)（P=0.0068）。
　　試驗(yàn)三：選取6頭體況發(fā)育良好，平均體重265.67±9.5 kg，中國西門塔爾雜交肉牛，飼喂0.15 mg/kg BW/d的SAL，給藥期21 d，停藥期14 d。分別在停藥第0、14 d各屠宰肉牛3頭，采集肝臟

7、、腎臟、肌肉、脂肪、眼、脾臟、肺臟等組織器官，采用 UPLC-MS/MS方法測定其中SAL殘留量，并使用UHPLC-Q-TOF MS法鑒定SAL在肝臟、腎臟組織中的代謝物。結(jié)果表明：停藥0 d時，SAL在肉牛體內(nèi)殘留分布廣泛，幾乎肉牛體內(nèi)所有的組織器官中均能檢測到 SAL殘留，但主要分布在肉牛肝臟、腎臟、脂肪、眼組織和房水等組織器官中，其中肝臟中 SAL殘留量最高（酶解前、后分別為53.6 ng/g、547.5 ng/g）其次為腎臟>脂