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1、 目的:關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞主要表達(dá)整合素α5β1,其正常表達(dá)對(duì)維持細(xì)胞存活具有重要作用。關(guān)節(jié)內(nèi)注射HA已經(jīng)被用于骨性關(guān)節(jié)炎(OA)的治療。多項(xiàng)研究報(bào)道HA在OA疾病進(jìn)展過(guò)程中對(duì)關(guān)節(jié)軟骨具有保護(hù)作用。為進(jìn)一步闡明HA對(duì)軟骨細(xì)胞的作用,本實(shí)驗(yàn)檢驗(yàn)了HA對(duì)體外培養(yǎng)軟骨細(xì)胞整合素α5亞單位表達(dá)的影響,探索HA保護(hù)軟骨細(xì)胞的作用機(jī)制。 方法:本實(shí)驗(yàn)首先無(wú)菌條件下收集截肢手術(shù)患者關(guān)節(jié)軟骨,以0.2﹪Ⅱ型膠原酶消化切碎的軟骨組織碎片,收獲軟骨細(xì)胞進(jìn)行
2、體外培養(yǎng)。利用Ⅱ型膠原抗體對(duì)所制備的細(xì)胞爬片進(jìn)行免疫細(xì)胞化學(xué)染色,鑒定軟骨細(xì)胞。然后以HA處理體外培養(yǎng)的關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞,應(yīng)用免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù),檢測(cè)HA作用后體外培養(yǎng)的關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞整合素α5亞單位的表達(dá)。最后應(yīng)用顯微圖像分析軟件對(duì)染色后的軟骨細(xì)胞爬片進(jìn)行灰度分析,比較實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組整合素表達(dá)的差異?! 〗Y(jié)論:1.HA能夠促進(jìn)體外培養(yǎng)關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞整合素α5亞單位表達(dá)。2.HA可能通過(guò)促進(jìn)整合素α5β1表達(dá),參與細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo),抑制軟骨細(xì)胞凋亡
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