黃芪對(duì)失血性休克再灌注腸粘膜肥大細(xì)胞活性及腸粘膜炎癥反應(yīng)的影響.pdf

1、大量臨床和實(shí)驗(yàn)研究表明，胃腸道是全身炎癥反應(yīng)(systemicinflammatoryresponsesyndrome，SIRS)和多器官衰竭(Multipleorgansdisfunctionsyndrome，MODS)的啟動(dòng)器官；在MODS的發(fā)病過程中，通過研究，人們發(fā)現(xiàn)源于胃腸功能障礙占發(fā)生率58.2％。失血性休克是常遇到的臨床問題，目前認(rèn)為：失血性休克、創(chuàng)傷性休克和低血容量休克所致的腸缺血-再灌注能引起腸粘膜屏障損害、腸道炎癥反

2、應(yīng)和腸源性介質(zhì)釋放，出現(xiàn)炎癥失控，進(jìn)一步發(fā)展有可能導(dǎo)致多器官衰竭。近年來有學(xué)者觀察到：多器官衰竭時(shí)腸粘膜肥大細(xì)胞存在大量活化現(xiàn)象，是引起病變加重的重要因素，因此，我們?cè)O(shè)想：在失血性休克-再灌注過程中腸粘膜肥大細(xì)胞活化可能是導(dǎo)致病變加重，向多器官衰竭發(fā)展的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，干預(yù)這一環(huán)節(jié)，有利于減少M(fèi)ODS的發(fā)生。目前用中藥來干預(yù)這一環(huán)節(jié)，進(jìn)行防治的研究尚未見文獻(xiàn)報(bào)道，在我們的前期研究中發(fā)現(xiàn)，黃芪具有抗重度失血性休克-再灌注腸粘膜損傷作用，因此，我

3、們認(rèn)為應(yīng)將已有一定研究基礎(chǔ)的黃芪迅速切入這一領(lǐng)域，以便與學(xué)科發(fā)展前沿相接軌，力爭使中藥在干預(yù)腸粘膜肥大細(xì)胞活化和腸道炎癥反應(yīng)這一途徑防治重度失血性休克-再灌注腸粘膜損傷研究中有所突破。 材料和方法: 1動(dòng)物分組健康清潔級(jí)Wistar大鼠32只，體重180～250g，雌雄各半。動(dòng)物隨機(jī)分成4組，假手術(shù)對(duì)照組，不進(jìn)行休克處理；模型組，再灌注前注射生理鹽水3.0mL；黃芪低劑量組，黃芪注射液按10g·kg-1，用生理鹽水稀釋到

4、3.0mL，再灌注前靜脈注入；黃芪高劑量組，黃芪注射液按20g·kg-1，用生理鹽水稀釋到3.0mL，于灌注前靜脈注入。 2動(dòng)物模型建立各組動(dòng)物術(shù)前禁食18h，3％戊巴比妥鈉45mg·kg-1腹腔注射，麻醉動(dòng)物，氣管切開，插入氣管導(dǎo)管，以保持呼吸道通暢，保留自主呼吸。分離右頸動(dòng)脈并置管用于動(dòng)脈血壓監(jiān)測；分離右股靜脈置管，用于給藥、回輸血液；操作平穩(wěn)后于10min內(nèi)放血使動(dòng)脈平均血壓降至并維持于5.3kPa，持續(xù)60min，建立重

5、度失血性休克及復(fù)蘇的動(dòng)物模型。為避免肝素對(duì)肥大細(xì)胞的影響，抽出的血液用10％枸櫞酸鈉按1：10混勻、抗凝，無菌保存；觀察60min后經(jīng)頸靜脈輸入治療用藥物或溶液3.0mL。5min內(nèi)間斷回輸全部所放血液，再觀察90min后取標(biāo)本。 3主要觀察批標(biāo)以下指標(biāo)：(1)光鏡觀察小腸組織病理結(jié)果，透射電鏡觀察腸粘膜組織超微結(jié)構(gòu)(2)腸粘膜組織TNF-α濃度。(3)腸粘膜組織組胺濃度。(4)腸粘膜組織MDA含量、SOD活性。(5)腸粘膜肥大

6、細(xì)胞胰蛋白酶表達(dá)、IMMC計(jì)數(shù)。 4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示，組間比較采用方差分析。P＜0.05為差異有顯著性。變量之間采用Pearson相關(guān)分析，P＜0.05為差異有顯著性。 結(jié)果: 1病理學(xué)改變4組中，模型組腸粘膜損傷最重，黃芪兩組損傷減輕，高劑量組效果優(yōu)于低劑量組，正常組無損傷，組間比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.01，)。 2小腸組織MDA含量MDA含量以模型組最高，MDA明顯高于正

7、常組與黃芪兩組(P＜0.01，0.05). 3小腸組織SOD活性以模型組最低(P＜0.05)，黃芪低高劑量組SOD活性仍低于正常組(P＜0.05)，但黃芪兩組間無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05，)。 4小腸組織組胺、TNF-α含量TNF-α含量以模型組和黃芪低劑量組最高(P＜0.01，0.05)，黃芪高劑量組與正常組無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)；組胺含量以模型組最低(P＜0.05)，黃芪低、高劑量組數(shù)值上雖低于正常組，但組間無

8、統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05，)。 5IMMC超微結(jié)構(gòu)變化與正常組比較，模型組IMMC胞漿顆粒明顯減少，顆粒包膜相互融合形成細(xì)胞內(nèi)空泡等脫顆?，F(xiàn)象，黃芪組IMMC超微結(jié)構(gòu)形成空泡較少。 6IMMC數(shù)量變化免疫組化顯示模型組IMMC數(shù)目明顯增加(P＜0.01)，黃芪組IMMC數(shù)目與B組相比明顯下降(P＜0.01)。 結(jié)論: 1IMMC在失血性休克再灌注損傷的發(fā)病過程中同樣起著重要的作用。 2黃芪能夠通過