C反應(yīng)蛋白在代謝綜合征及其靶器官損害中的作用.pdf

1、背景和目的代謝綜合征(metabolicsyndrome，MS)具有多重心血管危險(xiǎn)因素聚集的特征，其危害性明顯大于單一成分。近年來國內(nèi)外MS發(fā)病率呈急劇上升趨勢(shì)，已成為當(dāng)今主要的社會(huì)現(xiàn)象和公共衛(wèi)生問題之一，研究MS的流行病學(xué)趨勢(shì)、危險(xiǎn)因素、發(fā)病特征、病理生理機(jī)制對(duì)指導(dǎo)MS的治療、預(yù)防及預(yù)后均具有重要的意義。目前觀點(diǎn)認(rèn)為MS是環(huán)境因素和遺傳因素相互作用的結(jié)果，飲食方式不當(dāng)和運(yùn)動(dòng)減少對(duì)MS的發(fā)生發(fā)展可能起著重要作用。MS發(fā)病環(huán)節(jié)復(fù)雜，發(fā)生機(jī)

2、制仍不清楚，胰島素抵抗(insulinresistance，IR)是MS的中心環(huán)節(jié)。 研究表明，MS是一種全身性慢性低度炎癥性疾病狀態(tài)，炎癥在MS的發(fā)生發(fā)展中可能起到重要作用。許多炎癥因子如IL-6、IL-1、TNF-α及CRP等與MS及組分之間關(guān)系密切，CRP在MS中的作用倍受關(guān)注。CRP是一種急性炎癥時(shí)相反應(yīng)蛋白，是先天性免疫防御因子之一，可以通過經(jīng)典途徑激活補(bǔ)體，消耗補(bǔ)體，釋放炎癥介質(zhì)；活化淋巴細(xì)胞；激活血小板等。CRP在

3、肝臟、胰腺、脂肪組織、心肌和血管等組織中均有表達(dá)，它的合成和表達(dá)受激活的單核細(xì)胞、成纖維細(xì)胞及某些細(xì)胞因子(如IL-6、IL-1β、IL-8、轉(zhuǎn)化生長因子-β(TGF-β)和TNF-α等)的調(diào)控，其中IL-6和TNF-α是CRP合成和分泌的主要刺激物。血清CRP基線水平在健康人群中可以比較準(zhǔn)確地預(yù)測未來心臟病、中風(fēng)、心臟猝死危險(xiǎn)性和外周血管性疾病的發(fā)生情況。由于CRP與MS及其組分的關(guān)系密切，且為重要的炎癥因子，因此CRP有可能成為MS

4、發(fā)生的靶分子之一。血清CRP濃度與MS的組分?jǐn)?shù)量及其靶器官損害之間、CRP基因變異與MS及其組分之間的關(guān)系仍不明確；CRP是否可以作為MS的獨(dú)立危險(xiǎn)因素和預(yù)后的預(yù)報(bào)因子也尚未闡明；CRP促進(jìn)MS的發(fā)生發(fā)展的病理生理和分子機(jī)制仍然不明。因此，本研究采用回顧性研究明確CRP與MS及其靶器官損害之間的關(guān)系，并明確了CRP是否可以作為MS的危險(xiǎn)因素；通過建立與人類相近的MS大鼠，從分子水平探討CRP在MS發(fā)生發(fā)展中的作用。 對(duì)象與方法一

5、、臨床研究①受試者801例，其中男性393例，女性408例。MS患者404例，男132例，女272例，年齡54.5±13.7歲；非MS患者397例，男261例，女136例，年齡58.0±12.8歲。MS的診斷標(biāo)準(zhǔn)采用NCEPATPⅢ指南標(biāo)準(zhǔn)，其中腹圍的診斷標(biāo)準(zhǔn)采用亞太地區(qū)標(biāo)準(zhǔn)。②常規(guī)檢測高敏C反應(yīng)蛋白(high-sensitivityCRP,hs-CRP)、BP、腹圍、TC、TG、HDL-C、LDL-C、FBG、UAER，其中469例行

6、頸動(dòng)脈超聲檢測IMT，429例行超聲心動(dòng)圖檢測心臟結(jié)構(gòu)和功能。③采用PCR-RFLP技術(shù)進(jìn)行CRP基因1059位G/C多態(tài)性檢測。 二、實(shí)驗(yàn)研究①一般資料：健康2月齡雄性Wistar大鼠40只，隨機(jī)分為普食對(duì)照組(ND)和高脂飲食組(HF)，每組20只。以長期(52周)高脂(脂肪占總熱能49％)高鹽飲食復(fù)制MS模型，測量大鼠體重、血壓、心率、空腹血糖、血脂，行高胰島素一正常血糖鉗夾試驗(yàn)。②靶器官損害指標(biāo)：血流動(dòng)力學(xué)(HR、LVS

7、P、LVEDP和±dp/dtmax)檢測心功能；油紅O染色觀察動(dòng)脈粥樣斑塊形成狀況；用代謝籠喂養(yǎng)收集24h尿液檢測微量蛋白尿。③分子生物學(xué)指標(biāo)：心臟、主動(dòng)脈、白色脂肪組織和棕色脂肪組織CRPmRNA和蛋白表達(dá)。 主要研究結(jié)果一、臨床研究1.一般臨床資料：MS組的腹圍、TC、TG、LDL-C、SBP、DBP、FPG以及反映靶器官損害指標(biāo)的LVMI、IMT、UAER明顯高于非MS組，HDL-C明顯低于非MS組，MS組的平均年齡高于非

8、MS組(P＜0.05或P＜0.01)。 2.hs-CRP與MS組分?jǐn)?shù)量之間的關(guān)系：血清hs-CRP水平隨著MS組分?jǐn)?shù)量的增加而升高(P＜0.001)。 3.MS組分對(duì)hs-CRP的影響：當(dāng)各單項(xiàng)指標(biāo)達(dá)到MS診斷標(biāo)準(zhǔn)時(shí)，血中hs-CRP濃度明顯上升(P＜0.05或P＜0.01)。 4.hs-CRP水平與MS各組分之間的相關(guān)性：血清hs-CRP水平與腹圍、TG、BP、FPG呈正相關(guān)，而與HDL-C呈負(fù)相關(guān)(P＜0.0

9、5或P＜0.01)。 5.hs-CRP可作為MS的危險(xiǎn)因素：①隨著血清hs-CRP水平的升高，MS的危險(xiǎn)性亦隨之上升(P＜0.01)；②高h(yuǎn)s-CRP水平促進(jìn)MS的發(fā)生(OR=1.155，95％CI=(1.107，1.206)，P＜0.01.)；③根據(jù)有無MS分層描繪ROC曲線，計(jì)算ROC曲線下面積為0.72(95％CI0.69-0.76，P＜0.001)；④MS患者CRP最佳臨界診斷點(diǎn)為3mg/L診斷靈敏度為55.7％，特異性

10、為78.1％。 6.hs-CRP水平與MS靶器官損害的相關(guān)性：血清hs-CRP水平與IMT、LVMI和UAER呈正相關(guān)。 7.CRP1059G/C基因多態(tài)性與MS的關(guān)系：①GG、GC基因型(因CC基因型極為罕見而在本研究中未發(fā)現(xiàn))分布頻率為90.9％、9.1％，G、C等位基因的分布頻率為95.45％、4.55％；MS組與非MS組的1059G/C基因型和等位基因的分布趨勢(shì)相同(P＞0.05)。②GG基因型的血清hs-CRP

11、水平顯著高于GC基因型(P＜0.05)；在MS組分中，GG基因型的SBP、腹圍、FPG高于GC基因型(P＜0.05)，而對(duì)MS其他組成成分及其靶器官損害無影響(P＞0.05)。 二、實(shí)驗(yàn)研究1.MS大鼠的一般特征：HF組的體重、腹圍、腹部脂肪和棕色脂肪重量、Lee's指數(shù)、FAT％、TG、空腹血糖等指標(biāo)均高于ND組，HDL-C低于ND組，基本符合人類MS臨床特征，組間比較有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。 2.MS大鼠

12、靶器官損害狀況：HF組心臟、血管和腎臟損害比ND組更嚴(yán)重(P＜0.05或P＜0.01)。 3.RT-PCR結(jié)果：CRP基因在HF組心臟、白色脂肪組織和棕色脂肪組織的表達(dá)水平高于ND組，尤其在腸系膜中表達(dá)明顯增加(P＜0.05)，主動(dòng)脈在高脂組有輕度上升(P＞0.05)。 4.Westernblot結(jié)果：CRP在HF組心臟、白色脂肪組織和棕色脂肪組織的蛋白表達(dá)水平高于ND組，尤其在心肌組織中表達(dá)明顯增加(P＜0.05)，而