大鼠腦出血致多器官功能障礙綜合征模型下丘腦、延髓內(nèi)臟帶與迷走神經(jīng)作用機(jī)制研究.pdf

1、目的：大鼠腦出血(CH)致多器官功能障礙綜合征(MODS)模型術(shù)后觀察肺、肝、腎和小腸的病理改變;免疫組化法檢測(cè)下丘腦FOS蛋白的表達(dá)及延髓內(nèi)臟帶(MVZ)乙酰膽堿轉(zhuǎn)移酶(CHAT)的表達(dá)。探討腦出血致多器官功能障礙綜合征大鼠模型下丘腦、延髓內(nèi)臟帶及迷走神經(jīng)的作用;揭示腦源性多器官功能障礙綜合征(CMODS)時(shí)下丘腦、延髓內(nèi)臟帶及迷走神經(jīng)的可能調(diào)控機(jī)制。
　　 方法：
　　 1.Wistar大鼠80只隨機(jī)分為:假手術(shù)組(

2、10只)、迷走神經(jīng)切斷(SDV)組(10只)、腦出血(CH)組(20只)、腦出血+迷走神經(jīng)切斷(CH+SDV)組(20只)、腦出血+迷走神經(jīng)刺激(CH+SIV)組(20只)。
　　 2.采用尾狀核膠原酶0.8U和3.5IU肝素鈉混合液注入法制作大鼠CH模型;迷走神經(jīng)切斷(SDV)組大鼠麻醉后行剖腹術(shù),于胃小彎處暴露迷走神經(jīng)左右兩干支,在距離迷走神經(jīng)各分支約5mm處用絲線結(jié)扎左右兩干支并切斷。迷走神經(jīng)刺激(SIV)組大鼠手術(shù)暴露雙

3、側(cè)頸部迷走神經(jīng);將銀質(zhì)電極做成套圈柄,套圈柄外側(cè)刷絕緣漆,套圈內(nèi)側(cè)為電極面,將套圈扣住迷走神經(jīng),灌入石蠟油與周圍組織絕緣,從頸部后面穿出皮膚,縫合切口。
　　 3.記錄大鼠腦出血術(shù)后各時(shí)相點(diǎn)的體溫、心率、呼吸等癥狀和體征變化,檢測(cè)血常規(guī)、肝、腎功能及心肌酶改變,光鏡下觀察大鼠腦出血術(shù)后24小時(shí)時(shí)相點(diǎn)肺、肝、腎、小腸各器官組織的病理變化并拍照,依據(jù)診斷標(biāo)準(zhǔn)判斷SIRS、MODS的發(fā)生率。
　　 4.應(yīng)用免疫組織化學(xué)ABC法

4、觀察下丘腦FOS蛋白的表達(dá)。
　　 5.免疫組化法檢測(cè)延髓內(nèi)臟帶內(nèi)乙酰膽堿轉(zhuǎn)移酶(CHAT)的表達(dá)。
　　 結(jié)果：
　　 1.CH組、CH+SDV組和CH+SIV組大鼠均發(fā)生SIRSI;CH組符合MODS的大鼠70.0％(14只);CH+SDV組符合MODS的大鼠75.0％(15只);CH+SIV組符合MODS的大鼠65.0％(13只)。
　　 2.假手術(shù)組和SDV組肝、腎功能和心肌酶異常程度無明顯差別,

5、肝、腎、肺、腸組織病理?yè)p傷均輕。CH+SDV組、CH+SIV組和CH組的肝、腎功能、心肌酶異常程度以及肝、腎、肺、腸病理?yè)p傷均重于假手術(shù)組和SDV組,CH+SDV組重于CH組,而CH+SIV組明顯輕于CH組。
　　 3.CH+SDV組大鼠下丘腦內(nèi)FOS蛋白陽(yáng)性表達(dá)明顯多于假手術(shù)組(9.3±2.6與2.5±0.4,t=8.17,P＜0.01)和SDV組(9.3±2.6與2.9±0.5,t=7.64,P＜0.01),但明顯少于CH組

6、(9.3±2.6與48.6±18.1,t=6.80,P＜0.01),CH組明顯少于CH+SIV組(48.6±18.1與74.25±6.29,t=4.23,P＜0.01)
　　 4.CH+SDV組MVZ內(nèi)CHAT陽(yáng)性表達(dá)明顯多于假手術(shù)組(138.49±11.76與108.15±9.54,t=5.39,P＜0.01)和SDV組(138.49±11.76與110.71±9.88,t=4.83,P＜0.01),但明顯少于CH組(138.