未甲基化CpG脫氧寡聚核苷酸（CpG ODN）對(duì)小鼠脾細(xì)胞產(chǎn)生IgE的抑制作用.pdf

1、變態(tài)反應(yīng)性疾病(allergic disease)是指機(jī)體被某種變應(yīng)原物質(zhì)致敏后，再次與類似變應(yīng)原性的物質(zhì)接觸后所產(chǎn)生的異常或過強(qiáng)的免疫反應(yīng)所導(dǎo)致的疾病。本文以小鼠脾細(xì)胞IgE的產(chǎn)牛為指標(biāo)，從不同角度研究了CpG ODN的抑制作用及其可能的機(jī)制，使得對(duì)CpG ODN的認(rèn)識(shí)更加全面，為臨床治療提供基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 材料和方法： 1.取正常雌性BALB/C小鼠，制備單個(gè)小鼠脾細(xì)胞懸液或純化B細(xì)胞懸液，在CpGODN存在或不存在

2、情況下，用IL-4+anti-CD40刺激培養(yǎng)細(xì)胞，用ELISA方法檢測(cè)培養(yǎng)上清中IgE產(chǎn)生的量，觀察不同時(shí)間或不同濃度加入CpG ODN對(duì)小鼠脾細(xì)胞或純化B細(xì)胞產(chǎn)生IgE的影響。在CpG ODN存在的情況下，用IL-4+anti-CD40刺激培養(yǎng)細(xì)胞，并分別加入抗IFN-γ或抗lL-12，收集培養(yǎng)7天的細(xì)胞上清液，用ELISA方法檢測(cè)IgE產(chǎn)生的量，觀察抗IFN-γ或抗IL-12對(duì)CpG ODN抑制IgE產(chǎn)生作用的影響。 2.

3、在CpG ODN存在或不存在情況下，用或不用CFSE標(biāo)記后，再用IL-4+anti-CD40刺激培養(yǎng)細(xì)胞，3天后收集細(xì)胞，經(jīng)相應(yīng)熒光抗體染色后，使用流式細(xì)胞儀進(jìn)行分析，觀察CpG ODN對(duì)B細(xì)胞分裂和活化的影響。 結(jié)論： 1.CpG ODN能夠抑制IL-4+anti-CD40刺激小鼠脾細(xì)胞和純化B細(xì)胞產(chǎn)生IgE，其抑制作用呈劑量依賴性和時(shí)間限制性。 2.抗IFN-γ和抗IL-12單克隆抗體不能完全拮抗CpG OD