基因芯片篩選胃癌5-FU耐藥基因標志譜及其耐藥細胞株的建立.pdf

1、內(nèi)蒙古醫(yī)學院碩士學位論文基因芯片篩選胃癌5-FU耐藥基因標志譜及其耐藥細胞株的建立姓名：齊力申請學位級別：碩士專業(yè)：外科學指導教師：孟興凱;侯明星20080501內(nèi)蒙古醫(yī)學院碩士研究生學位論文( 2 0 0 8 年)中 文 摘 要目的利用化療藥物對胃癌細胞株B G c 一8 2 3 反復篩選、誘導，建立具有耐藥性的胃癌細胞株，并與親代細胞株B ( Z 一8 2 3 對比生長特性及基因譜表達改變。初步探討胃癌的耐藥機制，為胃癌臨床化療方法

2、改進提供理論依據(jù)。方法 1 、體外培養(yǎng)胃癌細胞株B G C 一8 2 3 。利用M ，r T 法進行舌癌細胞株的梯度急性毒性試驗，了解各種化療藥物不同濃度對胃癌細胞株B G C 一8 2 3 的殺傷效應(yīng)，估計化療藥物的長期效應(yīng)，為耐藥細胞株的誘導、篩選尋找合適的初始劑量和藥物濃度提升梯度。2 、利用5 一氟脲嘧啶( 5 一n l l 砌卜r a c i l ，5 一F u ) 大劑量濃度逐漸遞增間歇給藥的方法殺死絕大部分敏感的B G C

3、 一8 2 3 細胞后，撤除化療藥物，讓剩余的細胞在無藥培養(yǎng)基中繼續(xù)培養(yǎng)，使其逐漸恢復生長達到可以常規(guī)傳代的水平。再次加入化療藥物，重復以上過程，通過反復誘導、篩選，得到胃癌耐藥細胞株，分別命名為B G C 一8 2 3 ／F u o 3 、對比親代細胞株T c a 8 1 1 3 及其耐藥細胞株T c a 8 1 1 3 ／C a 和T c 勰1 1 3 ／F u 之間的形態(tài)改變o4 、分別抽提親代細胞株和兩個耐藥細胞株( T c a

4、 8 1 1 3 ，T c a 8 1 1 3 ／C a 和T c a 8 1 1 3 ／F u ) 的總礎(chǔ)蛆，進行基因芯片分析對比它們基因表達譜的改變。結(jié)果1 、通過間歇加藥的方法建立了胃癌細胞株5 一氟脲嘧啶耐藥細胞株，命名為B G C 一8 2 3 ／F u ；2 、用耐藥細胞株B G C 一8 2 3 ／F u 的基因表達譜對比親代細胞株B G C 一8 2 3 基因表達譜，有9 7 條基因表達出現(xiàn)差異，其中6 4 條基因發(fā)生上