益腎通絡(luò)方對腎病綜合征大鼠的藥效作用及其分子機制研究.pdf

1、目的：探討益腎通絡(luò)方治療腎病綜合征大鼠和影響大鼠腎小球系膜細胞增殖的作用機制。 方法 1．采用陽離子牛血清白蛋白復制腎病綜合征大鼠模型，隨機分為5組，即模型組，對照組(腎炎四味片組)，益腎通絡(luò)方低、中、高劑量組，每組各10只，并以10只同批正常大鼠為正常組。分別測定大鼠24小時尿蛋白，血清白蛋白，血肌酐，血尿素氮；觀察大鼠腎組織病理形態(tài)，測定面積比；免疫組織化學方法檢測大鼠腎組織白細胞介素-6(IL-6)、轉(zhuǎn)化生長因子-B1(T

2、GF-B1)、Smad7的分布和含量。2．制備益腎通絡(luò)方大鼠血清，以脂多糖為刺激因子，將體外大鼠腎小球系膜細胞分為5組，即空白組、模型組(脂多糖組)、益腎通絡(luò)方低、中、高劑量組。以甲基偶氮唑鹽法(MTT)檢測系膜細胞增殖情況，以逆轉(zhuǎn)錄．聚合酶鏈反應(yīng)方法(RT-PCR)檢測系膜細胞IL-6、TGF-B1、Smad7信使核糖核酸(mRNA)表達。 結(jié)果： 1．益腎通絡(luò)方各劑量組24小時尿蛋白含量、血清肌酐、血尿素氮下降(P<0.01

3、)；血清白蛋白提高(P<0.01)；腎臟病理損害均有不同程度減輕，面積比減少(P<0.01)；IL-6、TGF-B1在腎組織的沉積減少，Smad7在腎組織的表達提高，其作用優(yōu)于模型組和腎炎四味片組，以益腎通絡(luò)方中、高劑量為佳(P<0.05，P<0.01)。2．IL-6與TGF-B1呈線性正相關(guān)(P<0.01)，Smad7與IL-6或TGF-β1呈負相關(guān)(P<0.05，P<0.01)。3．益腎通絡(luò)方含藥血清對體外大鼠腎小球系膜細胞增殖有明

4、顯抑制作用(P<0.05，P<0.01)，以高劑量為佳(P<0.01)；高劑量含藥血清組Smad7mRNA的表達明顯上調(diào)，而IL-6mRNA和TGF-β1mRNA的表達下調(diào)(P<0.01)。結(jié)論 1．益腎通絡(luò)方對腎病綜合征大鼠有良好的治療作用，能改善相關(guān)蛋白，改善腎功能，減輕腎臟病理損害；其作用機制之一在于抑制腎小球系膜細胞增殖。2．益腎通絡(luò)方能有效地抑制腎小球系膜細胞增殖；調(diào)節(jié)Smad7/TGF-β1/IL-6三者之間的相互作用是其分