sipW基因突變對解淀粉芽孢桿菌PEBA20生物膜形成及抑菌活性的影響.pdf

1、sipW基因是芽孢桿菌屬細菌的重要調控基因，表現(xiàn)出多種功能。本研究以植物內生生防細菌解淀粉芽孢桿菌PEBA20為材料，利用同源重組法構建了sipW基因缺失突變株，進而測定了該基因對PEBA20生物膜形成、抑菌活性和芽孢形成的影響。
　　本文主要研究結果如下：
　　1、將sipW同源前臂和同源后臂的連接產(chǎn)物sipWF-sipWB與自殺質粒PMUTin4經(jīng)雙酶切、T4連接酶連接得到重組自殺質粒sipWF-sipWB-PMUTin

2、4。將重組質粒經(jīng)電轉化方法轉化入B.amyloliquefaciens PEBA20感受態(tài)細胞中，采用紅霉素篩選法篩選獲得sipW基因缺失的PEBA20突變株；以缺失株DNA為模板進行PCR篩選陽性克隆，并通過測序確定獲得sipW基因缺失突變株。
　　2、觀察了B.amyloliquefaciens PEBA20 sipW基因缺失突變株的液氣界面和固氣界面生物膜形成過程，發(fā)現(xiàn)sipW基因缺失突變株固氣界面生物膜結構復雜程度略顯簡單

3、，液氣界面生物膜也較野生株為簡單，表明sipW基因調控了解淀粉芽孢桿菌生物膜形成過程。
　　3、檢測B.amyloliquefaciens PEBA20野生株和sipW突變株對三種植物病原真菌和三種植物病原細菌的抑菌活性。結果顯示，與野生株相比，sipW基因缺失突變株對三種指示真菌和三種指示細菌抑菌效果均下降，并且對其中某些真菌和細菌的抑菌作用差異顯著水平較為顯著。表明sipW基因的缺失突變影響了解淀粉芽孢桿菌對真菌和細菌的抑菌作