PGC-1α和HIF-1介導(dǎo)缺氧預(yù)處理細(xì)胞保護(hù)作用的機(jī)制研究.pdf

1、中山大學(xué)碩士學(xué)位論文PGC1α和HIF1介導(dǎo)缺氧預(yù)處理細(xì)胞保護(hù)作用的機(jī)制研究姓名：趙嘉申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：神經(jīng)病學(xué)指導(dǎo)教師：李玲20100520中山大學(xué)碩士學(xué)ti)=論文PGC—la和HIF1介導(dǎo)缺氧預(yù)處理細(xì)胞保護(hù)作用的機(jī)制研究RNA干擾技術(shù)被用于HIF1和PGC—la的恒定基因敲除，從而為兩者在缺氧預(yù)處理中起到的作用提供更為充分的證據(jù)。結(jié)果：在PCI2和動脈內(nèi)皮細(xì)胞中均能成功建立缺氧預(yù)處理模型，其中缺氧預(yù)處理的刺激強(qiáng)度均為30分鐘

2、，氧氣葡萄糖剝奪2小時(PCI2細(xì)胞)或10小時(內(nèi)皮細(xì)胞)及其后的再灌注24小時作為損傷刺激，預(yù)處理刺激與損傷刺激的時間間隔均為48小時。動脈內(nèi)皮細(xì)胞與PCI2在缺氧誘導(dǎo)下的細(xì)胞適應(yīng)性反應(yīng)在時程和強(qiáng)度上基本相同，表現(xiàn)為約15％的細(xì)胞活性得以保存、保護(hù)性因子不同程度的上調(diào)及過氧化水平的顯著降低。HIF1，PGC1a和VEGF時間依賴的表達(dá)規(guī)律與缺氧預(yù)處理誘導(dǎo)的細(xì)胞保護(hù)效應(yīng)時間窗相符。在HIF1和PGC一10L基因敲除的細(xì)胞株中，缺氧預(yù)處

3、理的保護(hù)作用明顯減弱，表現(xiàn)為減少細(xì)胞死亡的效應(yīng)消失、促進(jìn)VEGF和／或清除ROS的效應(yīng)不同程度的F降。其中，以PGC—la基因敲除后對VEGF和ROS的影響更為明顯。最后，在敲除HIF1和PGC1a基因的PC12細(xì)胞中，VEGF的表達(dá)無法由缺氧預(yù)處理誘導(dǎo)的其他機(jī)制參與代償；而在敲除PGC1a基因的內(nèi)皮細(xì)胞中，ROS的清除作用和VEGF的表達(dá)均不能由缺氧預(yù)處理誘導(dǎo)代償。結(jié)論：動脈內(nèi)皮細(xì)胞具有由缺氧預(yù)處理所誘導(dǎo)的缺血耐受性，且這一細(xì)胞適應(yīng)性

4、反應(yīng)的強(qiáng)度與時程與PCI2相似。HIF1和PGC—IQ在介導(dǎo)缺氧預(yù)處理產(chǎn)生的細(xì)胞保護(hù)作用中均不可缺少，其中PGC1(1在調(diào)控VEGF的表達(dá)和ROS清除上的作用較HIF1更為重要。在動脈內(nèi)皮細(xì)胞中，缺氧預(yù)處理的作用豐要通過PGC1a主導(dǎo)的ROS清除和VEGF的增加而產(chǎn)生：而在PCI2細(xì)胞中，相應(yīng)的作用主要通過HIF1和PGC1a主導(dǎo)的VEGF上調(diào)而實(shí)現(xiàn)。關(guān)鍵詞缺氧預(yù)處理，缺氧誘導(dǎo)因子一l(HIF—1)，過氧化物酶體增殖激活受體吖共刺激因子