蜂膠酚酸酯類成分對OGD-R致?lián)pN2a細(xì)胞的保護(hù)作用及機(jī)理研究.pdf

1、蜂膠是蜜蜂采集植物的樹皮和莖干上的粘性分泌物，加上它的上顎分泌物連同蜂蠟、酶和其它排泄物咀嚼后融合在一起形成的具有黏稠性的固體膠狀物。蜂膠含有豐富的活性物質(zhì)，對人類的健康有著抗氧化、抗腫瘤和免疫調(diào)節(jié)等重要作用。腦缺血再灌注損傷是指大腦組織缺血以后盡快恢復(fù)血液供應(yīng)，導(dǎo)致大腦組織損傷更加嚴(yán)重的現(xiàn)象。本文選擇小鼠神經(jīng)母細(xì)胞瘤 N2a細(xì)胞， OGD/R損傷模型，體外模擬腦缺血再灌損傷，用CCK-8法檢測細(xì)胞存活率和吉姆薩染色觀察細(xì)胞的形態(tài)為檢測

2、指標(biāo)，研究蜂膠組分以及蜂膠中單體化合物體外抗腦缺血再灌注損傷的作用。
　　本研究是國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(31272509)的部分內(nèi)容,在前期探明蜂膠中部分黃酮類化合物具有很好的體外抗腦缺血再灌損傷作用的基礎(chǔ)上，以山東蜂膠70％乙醇提取物的乙酸乙酯萃取物為原料，繼續(xù)探尋蜂膠中具有抗腦缺血再灌注損傷作用的非黃酮類化合物。通過柱層析對原料進(jìn)行分離純化得到四個(gè)組分，通過活性篩選發(fā)現(xiàn)Fr.3的活性最高，對Fr.3進(jìn)行進(jìn)一步分離純化，制備出咖

3、啡酸肉桂酯、咖啡酸苯乙酯和咖啡酸芐酯三個(gè)單體化合物。對上述化合物進(jìn)行活性篩選，結(jié)果表明，咖啡酸苯乙酯和咖啡酸肉桂酯均具有顯著的體外抗腦缺血再灌注損傷作用，而咖啡酸芐酯在此濃度（5、10、15uM）下無保護(hù)作用。說明咖啡酸肉桂酯和咖啡酸苯乙酯是蜂膠中酚酸酯類活性成分。咖啡酸苯乙酯的活性前人已有研究，但咖啡酸肉桂酯的抗腦缺血再灌注損傷作用為本研究首次發(fā)現(xiàn)，因此有必要探討其作用機(jī)理。
　　腦缺血再灌注損傷的重要機(jī)制是活性氧自由基和NO損

4、傷，用咖啡酸肉桂酯干預(yù)OGD/R致?lián)p的小鼠神經(jīng)母細(xì)胞瘤N2a細(xì)胞，以CAT、SOD1、GPX1、NO和NOS為檢測指標(biāo)研究其體外抗腦缺血再灌注損傷的作用機(jī)理。結(jié)果表明，咖啡酸肉桂酯能顯著提高CAT、SOD1和GPX1的含量，降低NO含量和NOS活性，從而起到抗腦缺血再灌注損傷的作用。
　　選取東北地區(qū)六個(gè)不同地域的蜂膠：撫松、敦化、本溪、建昌、北票和完達(dá)山蜂膠，對其進(jìn)行活性篩選，同時(shí)檢測各個(gè)樣品中已知活性成分松屬素和標(biāo)志性成分P-