慢病毒導(dǎo)入的CDC25B3 siRNA對(duì)胰腺癌細(xì)胞CFPAC-1生物學(xué)行為的影響.pdf_第1頁(yè)
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1、目的：利用已構(gòu)建成功的、在人胰腺癌細(xì)胞系CFPAC-1中穩(wěn)定抑制CDC2583的重組慢病毒，建立CDC2583表達(dá)降低的細(xì)胞系，以研究該基因的作用。 方法：將產(chǎn)生CDC2583 siRNA分子的攜帶綠色熒光蛋白(GFP)的重組慢病毒感染細(xì)胞后，用流式細(xì)胞儀篩選穩(wěn)定表達(dá)GFP的細(xì)胞；應(yīng)用RT-PCR和Western blot對(duì)細(xì)胞中CDC2583的mRNA和蛋白表達(dá)水平進(jìn)行分析；用MTT法、流式細(xì)胞儀、平板克隆形成和Transwe

2、ll小室法分別檢測(cè)其對(duì)細(xì)胞增殖、周期、細(xì)胞克隆形成能力和遷移侵襲能力的影響。 結(jié)果：CDC2583 siRNA顯著下調(diào)了CFPAC-1細(xì)胞中CDC2583的表達(dá)，所構(gòu)建的重組慢病毒導(dǎo)入的siRNA有較高的沉默效率，CFPAC-1細(xì)胞的增殖能力、克隆形成能力以及遷移侵襲能力顯著增強(qiáng)，細(xì)胞周期無(wú)明顯改變。 結(jié)論：CDC2583基因可顯著地影響胰腺癌CFPAC-1細(xì)胞的增殖、克隆形成和遷移侵襲能力，本研究為利用CDC2583所

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