趨化因子配體16在胰腺癌細胞株中的表達及對其生物學行為的影響.pdf

1、目的：探討趨化因子配體16(CXCL16)在胰腺癌組織和細胞系中的表達,并研究其影響因素及外源性CXCL16對胰腺癌細胞系生物學行為的影響。
　　 方法：用免疫組化方法檢測30例胰腺癌及癌旁組織中CXCL16的表達,并分析其與臨床分期、淋巴結轉移及組織分化的關系。
　　 用逆轉錄.聚合酶鏈式反應(RT-PcR)和酶聯(lián)免疫吸附方法(EUSA)檢測胰腺癌細胞系PANC-1和ASPC-1中CXCL16轉錄和翻譯水平的表達。

2、r>　　 細胞因子TNF-a、IL-1β在10、50、100、200ng/ml濃度下分別加入細胞系中,并用ELISA檢測CXCL16的分泌,不加TNF-a和IL-1β作為對照。另外,對比同時加入200ng/ml的TNF-a和IL-1β較單一因素對CXCL16分泌的影響。
　　 取對數(shù)生長期的胰腺癌細胞系PANC-1和ASPC-1,分別加入50、100、200ng/ml的rhCXCL16和CXCL16中和性抗體,以不加rhCXC

3、L16作為對照組。采用噻唑藍(MTT)法檢測細胞增殖,采用Matrigel基質膠檢測細胞的粘附率；采用Transwell小室檢測細胞侵襲和遷移能力。
　　 結果：CXCL16在80.00％的胰腺癌中表達,僅在26.67％的癌旁組織中表達(P<0.005)。CXCL16的表達與TNM分期和淋巴結轉移呈正相關(P<0.05),而與組織分化無關。
　　 CXCL16mRNA電泳條帶可以用RT-PCR方法檢測到。106/ml細胞

4、濃度下,PANC-1和ASPC-1的CXCL16OD值分別為215.3±14.9和170.0±11.6。
　　 TNF-a于200ng/ml濃度下,PANC-1和ASPC-1CXCL16OD值分別為460.3±46.4和421.5±44.6,顯著高于對照組的90.7±3.5和83.2±4.5(P<0.05)。IL-1β于200ng/ml濃度下,PANC-1和ASPC-1CXCL16OD值分別為421.5±44.6和367.7±4

5、6.0,顯著高于對照組的90.7±3.5和83.2±4.5(P<0.05)。TNF-a和IL-1β于200ng/ml濃度共同作用下,PANC-1和ASPC-1CXCL16OD值為481.2±50.0和433.34±45.0,與對照組無明顯差異。
　　 100ng/mlrhCXCL16處理PANC-1后,細胞增殖、粘附率、侵襲性和遷移性分別為0.227±0.021、(91.4±8.6)％、1.246±0.216、1.361±0.2

6、76,其中細胞對基質的粘附率、侵襲性和遷移性顯著高于對照組的(20.6±3.2)％、0.259±0.013、0.199±0.008(P<0.05),對增殖性無顯著影響。200ng/mlrhCXCL16處理PANC-1后,細胞對基質的粘附率、侵襲性和遷移性進一步提高到(92.1±6.3)％、1.511±0.174、1.600±0.208(P<0.05)。100ng/mlrhCXCL16處理ASPC-1后,細胞增殖、粘附率、侵襲性和遷移性分

7、別為0.249±0.016、(89.9±6.7)％、1.646±0.200、1.596±0.211,其中細胞對基質的粘附率、侵襲性和遷移性顯著高于對照組的(21.6±3.8)％、0.245±0.012、0.190±0.010(P<0.05),對增殖性無顯著影響。200ng/mlrhCXCL16處理ASPC-1后,細胞對基質的粘附率、侵襲性和遷移性進一步提高到(94.0±8.2)％、1.876±0.290、1.900±0.237(P<0.

8、05)。
　　 結論：CXCL16在胰腺癌組織中較癌旁組織顯著性高表達,并協(xié)同癌的發(fā)展。
　　 在轉錄和翻譯水平上,PANC-1和ASPC-1存在CXCL16mRNA和蛋白的表達。
　　 TNF-a和IL-1β可分別促進細胞系分泌CXCL16,但二者聯(lián)合較單一因素并無顯著性增強。
　　 rhCXCL16可誘導胰腺癌細胞系PANC-1和ASPC-1增強對基質的粘附性、侵襲性和遷移性,但對增殖性無顯著提高作用