TLR4配基可以通過人類的血小板特異地調(diào)節(jié)炎性因子的釋放.pdf

1、目的： 為了驗(yàn)證在TLR－4配基(埃希氏菌屬大腸肝菌脂多糖，LPS)，即內(nèi)毒素刺激下，內(nèi)毒素和血小板表面Toll-4受體作用后，引起血小板激活，導(dǎo)致相應(yīng)的免疫因子釋放的改變。由此，證實(shí)TLR-4配基可以通過人類的血小板特異地調(diào)節(jié)炎性因子的釋放，血小板表面Toll-4受體與炎癥過程密切相關(guān)。 方法： 提取15例健康人全血，制備富血小板血漿。將制備的富血小板血漿使用單克隆抗人Fcγ R II抗體處理，以去除其干擾。將

2、已處理富血小板血漿分組：組1.分別用不同濃度的內(nèi)毒素(分別為0、1、3及5μg/ml)刺激富血小板血漿，通過流式細(xì)胞技術(shù)獲得TLR-4陽性檢出率，比較內(nèi)毒素的有無及不同濃度的內(nèi)毒素對TLR-4檢出率的影響；組2.將富血小板血漿分別在含有及不含有TLR-4單抗阻斷劑的內(nèi)毒素中充分孵育，用ELISA方法測定炎性因子IL-8，β-TG，sCD40L，TNF-α的釋放量，比較內(nèi)毒素及TLR-4單抗阻斷劑對上述四種炎性因子釋放的影響。 結(jié)

3、果： 1.來自于大腸桿菌的脂多糖(內(nèi)毒素)可以引起血小板膜表面TLR-4的陽性檢出率下降(P<0.01)，不同濃度的內(nèi)毒素劑量對TLR-4的表達(dá)影響無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，各組間比較(P>0.05)。2.TLR-4作用的血小板活化過程不引起IL-8的釋放改變(P=0.657)；sCD40L、β-TG及TNF-α表現(xiàn)為在Toll-4受體配基刺激后釋放增加，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.01)。3.內(nèi)毒素對分泌因子的調(diào)節(jié)作用因血小板用抗TLR-4單