MCP-1DNA疫苗治療Pristane誘導BALB-c狼瘡鼠模型的實驗研究.pdf

1、目的：應用單核細胞趨化蛋白-1（MCP-1）基因片段的DNA疫苗免疫Pristane誘導BALB/c鼠狼瘡模型，研究MCP-1DNA疫苗對鼠狼瘡模型的免疫抑制作用以及對腎臟的保護效果。
　　 方法：建立Pristane誘導BALB/c小鼠狼瘡模型，分別設(shè)狼瘡模型組、疫苗組、空質(zhì)粒組和正常對照組。純化制備含有編碼MCP-1基因片段的DNA疫苗，接種于Pristane誘導的BALB/c鼠狼瘡模型。測定各組小鼠體質(zhì)量、24小時尿蛋白定

2、量、ELISA法測定MCP-1抗體的水平、免疫熒光法檢測血清ANA；石蠟包埋HE染色光鏡下觀察小鼠腎臟病理變化、免疫組化標記MCP-1、CD68在腎臟內(nèi)的表達。
　　 結(jié)果：（1）體質(zhì)量測定：至第24周時正常對照組（25±1.0g）和疫苗組（24±2.3g）高于狼瘡模型組（18±2.7g）和空質(zhì)粒組（18.1±2.5g）（P＜0.05）。（2）尿蛋白定量（24h）：24周時正常對照組（0.189±0.089mg）和疫苗組（0.2

3、18±0.152mg）尿蛋白水平低于狼瘡模型組（0.696±0.321mg,）和空質(zhì)粒組（0.716±0.452mg）（P＜0.05）。（3）血清MCP-1抗體水平：24周時正常對照組（136.3±43.6 pg/ml）、狼瘡模型組（153.2±46.5pg/ml）和空質(zhì)粒組（146.3±31.6 pg/ml）MCP-1抗體水平明顯低于疫苗組（513.6±76.3 pg/ml）（P＜0.05），差異有統(tǒng)計學意義。（4）ANA抗體：24周

4、時 ANA抗體在正常對照組0只陽性，其余3組陽性率70.8％，各組之間ANA陽性率差異無統(tǒng)計學意義。（5）腎臟組織病理學改變：HE染色顯示狼瘡模型組和空質(zhì)粒組腎間質(zhì)可見大量炎性細胞浸潤和腎小球損傷，疫苗組炎性細胞浸潤明顯減少，正常對照組未見炎性細胞浸潤。（6）腎臟免疫組織化學染色（標記MCP-1、CD68）：狼瘡模型組、空質(zhì)粒組小鼠腎小管和腎間質(zhì)浸潤的炎癥細胞胞質(zhì)有MCP-1、CD68的表達，以腎小管表達明顯。而疫苗組二者的表達明顯減少