缺血后處理和腺苷后處理對(duì)熱缺血死亡大鼠供體心臟保護(hù)的研究.pdf

1、隨著移植技術(shù)的發(fā)展，供體的缺乏就成為研究人員所面臨的一個(gè)全球性難題。因此有研究人員開(kāi)始將研究目光轉(zhuǎn)向無(wú)心跳供體/尸體供體(non-heart-beating donors，NHBD)，嘗試使用臨床死亡后的尸體停搏心臟( cadaver non-beating heart，CNBH)來(lái)進(jìn)行心臟移植，以擴(kuò)大供體的來(lái)源。目前研究認(rèn)為臨床有望開(kāi)發(fā)利用的是院外急性失血性休克死亡的CNBH。由于在心臟停搏之前無(wú)法進(jìn)行有效的預(yù)處理，因此只能期望在熱缺

2、血過(guò)程之后通過(guò)后處理的方法來(lái)減輕心臟因熱缺血以及缺血/再灌注所帶來(lái)的損傷、改善移植后供心的功能。 目的：本研究在首先建立大鼠頸部異位心臟移植模型的基礎(chǔ)上，嘗試對(duì)熱缺血死亡后大鼠不同時(shí)段的供心，進(jìn)行缺血后處理以及腺苷后處理，檢測(cè)受體術(shù)后24小時(shí)移植心臟的相關(guān)指標(biāo)，來(lái)評(píng)價(jià)其心臟保護(hù)作用并探討可能機(jī)制。 方法：實(shí)驗(yàn)分為三大部分： 第一部分為大鼠頸部異位心臟移植模型的建立。 第二部分為缺血后處理對(duì)熱缺血死亡大鼠供

3、體心臟保護(hù)的研究。大鼠被隨機(jī)分為7組：C組-對(duì)照組；I5組、I15組、I30組-單純熱缺血組，供體大鼠失血性休克死亡后單純熱缺血5min、15min、30min取心移植組；P5組、P15組、P30組-缺血后處理組，供體大鼠失血性休克死亡后熱缺血5min、15min、30min取心移植并進(jìn)行缺血后處理組。移植術(shù)后24小時(shí)取移植心臟標(biāo)本，觀察其病理改變，檢測(cè)心肌組織ATP、SOD、MDA、NF-kB mRNA、TNF-α、IL-6的含量，以

4、及心肌細(xì)胞凋亡和Bcl-2、Bax蛋白的表達(dá)情況。 第三部分為腺苷后處理對(duì)熱缺血死亡大鼠供體心臟保護(hù)的研究。大鼠被隨機(jī)分為7組：C組一對(duì)照組；I5組、I15組、I30組-單純熱缺血組，供體大鼠失血性休克死亡后單純熱缺血5min、15min、30min取心移植組；A5組、A15組、A30組-腺苷后處理組，供體大鼠失血性休克死亡后熱缺血5min、15mln、30min取心移植并進(jìn)行腺苷后處理組。移植術(shù)后24小時(shí)取移植心臟標(biāo)本，觀察其

5、病理改變，檢測(cè)心肌組織ATP、SOD、MDA、NF-kB mRNA、TNF-α、IL-6的含量，以及心肌細(xì)胞凋亡和Bcl-2、Bax蛋白的表達(dá)情況。 結(jié)果： 1、熱缺血死亡30分鐘以內(nèi)，冷缺血1小時(shí)左右的大鼠CNBH可以被成功移植。 2、隨著熱缺血時(shí)間的延長(zhǎng)，移植心臟的缺血/再灌注損傷越重，病理?yè)p害也越重；而在同一時(shí)間點(diǎn)與單純熱缺血組相比，缺血后處理組和腺苷后處理組心肌細(xì)胞損害被減輕。 3、在同一時(shí)間點(diǎn)，

6、缺血后處理以及腺苷后處理與單純熱缺血組相比，可以增加心肌組織的ATP、SOD含量，減少其MDA含量；減少心肌組織的NF-kB mRNA的表達(dá)及TNF-α、IL-6的含量；減輕心肌細(xì)胞的凋亡水平、上調(diào)Bcl-2蛋白表達(dá)而下調(diào)Bax蛋白表達(dá)。 結(jié)論： 1、熱缺血死亡30分鐘以內(nèi)，冷缺血1小時(shí)左右的大鼠CNBH可以被成功應(yīng)用于心臟移植； 2、缺血后處理以及腺苷后處理對(duì)熱缺血死亡大鼠心臟移植的供心缺血/再灌注損傷具有保護(hù)

7、作用； 3、缺血后處理以及腺苷后處理的心臟保護(hù)作用可能與其改善供心的能量代謝、減輕脂質(zhì)過(guò)氧化損傷、抑制NF-KB表達(dá)所致炎性損傷以及減少心肌細(xì)胞的凋亡有關(guān)。 創(chuàng)新點(diǎn)： 1、本實(shí)驗(yàn)創(chuàng)新性的將后處理的概念引入心臟移植領(lǐng)域； 2、本實(shí)驗(yàn)首次研究缺血后處理對(duì)熱缺血死亡大鼠供體心臟保護(hù)的作用，國(guó)內(nèi)外未見(jiàn)相關(guān)報(bào)道； 3、本實(shí)驗(yàn)首次研究腺苷后處理對(duì)熱缺血死亡大鼠供體心臟保護(hù)的作用，國(guó)內(nèi)外未見(jiàn)相關(guān)報(bào)道。