急性重癥胰腺炎血管內(nèi)皮損傷機(jī)制及保護(hù)研究.pdf

1、目的：
　　通過(guò)體內(nèi)實(shí)驗(yàn)，從分子及整體兩個(gè)層面探討急性重癥胰腺炎(SAP)時(shí)血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷所致多器官功能障礙綜合征(MODS)的發(fā)生機(jī)制及白蛋白對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞胰蛋白酶損傷的保護(hù)作用，為臨床治療SAP提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法：
　　270只健康成年雄性SD大鼠隨機(jī)分為6組，每組45只。分組如下：
　　A組對(duì)照組即假手術(shù)組：開(kāi)腹后僅輕輕翻動(dòng)十二指腸和胰腺，關(guān)腹；
　　B組SAP模型組：以5％的?；悄懰徕c胰膽管

2、逆行注射誘導(dǎo)SAP模型；
　　C組奧曲肽組：SAP組+奧曲肽；
　　D組烏司他丁組：SAP組+奧曲肽+烏司他??；
　　E組白蛋白組：SAP組+奧曲肽+白蛋白；
　　F組混合組：SAP組+奧曲肽+烏司他丁+白蛋白。以上各組按時(shí)間點(diǎn)再隨機(jī)分為三組，分別為3h組、6h組、12hN，每組15只，各治療組動(dòng)物均于造模后30分鐘皮下注射奧曲肽25μg/kg。在此基礎(chǔ)上，D組給予烏司他丁1萬(wàn)U/kg；E組給予5％白蛋白10ml

3、/kg；F組給予烏司他丁1萬(wàn)U/kg+5％白蛋白10ml/kg；均經(jīng)大鼠陰莖背靜脈注射。每組按不同時(shí)間點(diǎn)隨機(jī)股靜脈取血處死大鼠，并收集胰腺、肝、腎、肺等臟器組織標(biāo)本。測(cè)定各組血清AMY、ALB、ALT、BUN、Cr等指標(biāo)；并對(duì)以上各臟器組織行病理形態(tài)學(xué)檢查，參照Schmidt評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)對(duì)SAP組大鼠各時(shí)間點(diǎn)胰腺組織進(jìn)行評(píng)分。流式細(xì)胞儀技術(shù)計(jì)數(shù)血循環(huán)中脫落的血管內(nèi)皮細(xì)胞(CEC)。采用免疫組化染色測(cè)定血管內(nèi)皮細(xì)胞緊密連接occludin蛋白

4、的表達(dá)。
　　結(jié)果：
　　1.5％?；悄懰徕c逆行胰膽管注射成功誘導(dǎo)了SAP并發(fā)MODS大鼠模型。
　　2.各組大鼠血清AMY、ALT、BUN、Cr、CEC計(jì)數(shù)在造模成功后3h明顯升高，呈逐漸上升的趨勢(shì)，12h達(dá)到高峰，而ALB及內(nèi)皮細(xì)胞緊密連接occludin蛋白的表達(dá)隨時(shí)間延長(zhǎng)逐漸降低。在相同時(shí)間點(diǎn)內(nèi)，SAP組大鼠各指標(biāo)的損傷程度最重，治療組中以?shī)W曲肽、烏司他丁與白蛋白混合治療組大鼠的損傷程度最輕。假手術(shù)組大鼠各時(shí)間