新型B細(xì)胞亞群的發(fā)現(xiàn)及其免疫調(diào)控功能與機(jī)制的研究.pdf

1、近年來，人們對(duì)于免疫細(xì)胞亞群及其功能的認(rèn)識(shí)大為拓展，特別是對(duì)于T細(xì)胞亞群的研究有了許多新的進(jìn)展，除了以往廣泛公認(rèn)的Th1、Th2之外，近年來對(duì)于調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(Treg)、Th17、Th9，Tfh等T細(xì)胞亞群的進(jìn)一步區(qū)分與功能特征的研究以及與臨床疾病的聯(lián)系，使得人們對(duì)于免疫應(yīng)答與免疫調(diào)控的細(xì)胞與分子機(jī)制研究有了更深入的認(rèn)識(shí)。此外，對(duì)于巨噬細(xì)胞和樹突狀細(xì)胞(DC)的亞群、特別是M2和調(diào)節(jié)性DC亞群的研究也有了新的進(jìn)展。但是，目前對(duì)于機(jī)體體液

2、免疫中最關(guān)鍵的免疫細(xì)胞---B細(xì)胞(B lymphocytes)的亞群及其相應(yīng)的功能特征的研究相比而言比較少。過去認(rèn)為B細(xì)胞通過分泌抗體，在體液免疫系統(tǒng)中發(fā)揮“指揮家”的作用；B細(xì)胞還是一類重要的抗原提呈細(xì)胞，參與對(duì)抗原的攝取、加工、提呈，在啟動(dòng)獲得性免疫應(yīng)答中起重要作用；此外，B細(xì)胞還可以通過分泌多種細(xì)胞因子和某些趨化因子以及表達(dá)某些重要膜分子，參與免疫應(yīng)答的調(diào)控?？梢?，B細(xì)胞具有功能多樣性，通過進(jìn)一步研究B細(xì)胞的亞群組成及其功能特征

3、，將有助于全面認(rèn)識(shí)B細(xì)胞的功能和作用，從而對(duì)免疫應(yīng)答與調(diào)控的方式與機(jī)制增添新的學(xué)術(shù)觀點(diǎn)。
　　 根據(jù)表面分子、定位和功能特點(diǎn)的不同，B細(xì)胞被分為B-1細(xì)胞和B-2細(xì)胞。B-2細(xì)胞即為傳統(tǒng)意義的B細(xì)胞。而B-1細(xì)胞主要在胚胎的胎肝、網(wǎng)膜中發(fā)育，分布于腹腔、胸腔和腸壁固有層中，又分為B-1a細(xì)胞(CD11b+CD5+)和B-1b細(xì)胞(CD11b+CD5-)。B-1細(xì)胞在IL-10幫助下保持自我更新能力，通過識(shí)別某些細(xì)菌表面共有的多糖

4、抗原和一些變形的自身抗原， B-1a細(xì)胞及其分泌的自身抗體在幼兒的抗感染免疫中提供有效保護(hù)，而B-1b細(xì)胞在感染時(shí)則能對(duì)多糖和其他非T細(xì)胞依賴性的抗原產(chǎn)生長(zhǎng)效的抗體應(yīng)答。近年來，人們發(fā)現(xiàn)了一類可以分泌IL-10的B細(xì)胞，根據(jù)其功能而將之稱為調(diào)節(jié)性B細(xì)胞(regulatory B cell)，作為一類新的B細(xì)胞亞群，其能夠調(diào)節(jié)機(jī)體免疫應(yīng)答，大量的基礎(chǔ)研究和臨床證據(jù)表明，B細(xì)胞的功能具有明顯的異質(zhì)性，提示B細(xì)胞在免疫應(yīng)答被激活后可能分化為多

5、個(gè)不同的功能亞群參與并調(diào)控免疫應(yīng)答，參與腫瘤、自身免疫性疾病等疾病的發(fā)生發(fā)展過程，因此，有關(guān)新的B細(xì)胞亞群的發(fā)現(xiàn)與功能分析成為近年來免疫學(xué)研究的熱點(diǎn)之一。
　　 由于天然免疫系統(tǒng)是機(jī)體抵御病原體入侵的第一道屏障，近年來已成為免疫學(xué)研究的重要領(lǐng)域，天然免疫應(yīng)答由NK細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞、中性粒細(xì)胞和肥大細(xì)胞等天然免疫細(xì)胞介導(dǎo)，通過模式識(shí)別受體識(shí)別細(xì)菌、真菌及病毒成分并活化，引發(fā)下游的多種免疫效應(yīng)，但B細(xì)胞在其中的作用如何尚

6、不明確。但一方面，B細(xì)胞能夠不依賴BCR信號(hào)介導(dǎo)而被活化；另一方面，由于B細(xì)胞能表達(dá)多種Toll樣受體(如TLR2、TLR3、TLR4、TLR5、TLR7、TLR9)和其他的模式識(shí)別受體識(shí)別，那么病原體感染后微環(huán)境中存在的多種TLR配體及模式識(shí)別配體有可能能夠通過與B細(xì)胞上的受體交聯(lián)，激發(fā)下游的信號(hào)傳遞，從而為B細(xì)胞參與天然免疫反應(yīng)以及隨后調(diào)控免疫反應(yīng)奠定了基礎(chǔ)。
　　 考慮到B細(xì)胞組成的異質(zhì)性以及B細(xì)胞參與天然免疫應(yīng)答和調(diào)控獲

7、得性免疫應(yīng)答的多樣性功能特點(diǎn)，我們?cè)诒狙芯恐蟹譃槿糠?，研究了病原體感染或者病原體成分激活天然免疫反應(yīng)之后B細(xì)胞的亞群組成，以及我們所發(fā)現(xiàn)和鑒定的新型B細(xì)胞亞群的功能特點(diǎn)與相關(guān)作用機(jī)制，還對(duì)B細(xì)胞發(fā)育和功能分化的轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控機(jī)制進(jìn)行了初步探討，以期為B細(xì)胞參與免疫應(yīng)答調(diào)控及其作用機(jī)制，以及其功能分化的分子機(jī)制增添新的認(rèn)識(shí)。
　　 一、CD19+DX5+B細(xì)胞亞群(NKB)的發(fā)現(xiàn)及其參與天然免疫、調(diào)控獲得性免疫的作用與相關(guān)機(jī)制。<

8、br>　　 二、CD19+PDCA-1+B細(xì)胞亞群的發(fā)現(xiàn)及其參與天然免疫功能與機(jī)制的研究。
　　 三、轉(zhuǎn)錄因子Foxp1對(duì)B細(xì)胞功能調(diào)控作用的初步探討。
　　 四、總結(jié)
　　 在第一部分實(shí)驗(yàn)中，發(fā)現(xiàn)并鑒定了一群具有NK細(xì)胞樣特征、能夠分泌IFN-γ的DX6+CD19++B細(xì)胞，稱為NKB細(xì)胞亞群。NKB細(xì)胞能在免疫應(yīng)答早期(李斯特菌感染3天內(nèi)天然免疫階段)通過分泌IFN-γ激活巨噬細(xì)胞、促進(jìn)其對(duì)胞內(nèi)菌的清除，發(fā)

9、揮了NK細(xì)胞樣的功能；NKB細(xì)胞能在免疫應(yīng)答晚期(李斯特菌感染7天獲得性免疫階段)通過分泌的IFN-γ上調(diào)自身FasL及抗原特異性CD8+T細(xì)胞表面Fas的表達(dá)，從而誘導(dǎo)CD8+T細(xì)胞凋亡，從而發(fā)揮了調(diào)節(jié)性B細(xì)胞的功能，適度控制了獲得性免疫應(yīng)答的強(qiáng)度，從而使得抗原特異性T細(xì)胞應(yīng)答反應(yīng)受到適度的負(fù)相調(diào)控，有助于維持免疫應(yīng)答的穩(wěn)定性?？梢?，該病原體感染誘導(dǎo)產(chǎn)生的新型NKB細(xì)胞亞群具有NK細(xì)胞的天然免疫應(yīng)答效應(yīng)和調(diào)節(jié)性B細(xì)胞的負(fù)相免疫調(diào)控功能

10、，其分泌的IFN-γ在介導(dǎo)其雙重功能中起重要的作用。新型B細(xì)胞亞群(DX5+CD19+NKB)的發(fā)現(xiàn)與初步揭示的其功能特點(diǎn)，為天然免疫的效應(yīng)機(jī)制增添了新的學(xué)術(shù)觀點(diǎn)，也豐富了人們對(duì)調(diào)節(jié)性B細(xì)胞的負(fù)向調(diào)控功能及機(jī)制的認(rèn)識(shí)，并為獲得性免疫負(fù)向調(diào)控提出了新機(jī)制。
　　 在第二部分實(shí)驗(yàn)中，發(fā)現(xiàn)并鑒定了一群能分泌IFN-α的CD19+PDCA-1+B細(xì)胞，該新型B細(xì)胞亞群能通過分泌的IFN-α而激活NK細(xì)胞并促進(jìn)其分泌IFN-γ，從而參與、

11、促進(jìn)了胞內(nèi)菌感染早期的天然免疫應(yīng)答過程。此外，我們的研究結(jié)果證明，IFN-α能正反饋調(diào)節(jié)IFN-γ信號(hào)通路，這一發(fā)現(xiàn)為病原體入侵機(jī)體后天然免疫應(yīng)答的快速啟動(dòng)及蛋白調(diào)控提出了新機(jī)制，也為B細(xì)胞的天然免疫功能增添了新的認(rèn)識(shí)。
　　 在第三部分實(shí)驗(yàn)中，我們對(duì)B細(xì)胞及其亞群的發(fā)育及功能分化的轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控機(jī)制進(jìn)行了初步探討，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在LPS體外刺激和李斯特菌體內(nèi)感染后轉(zhuǎn)錄因子Foxp1的表達(dá)均能促進(jìn)B細(xì)胞分泌IL-10，但其炎性因子分泌

12、變化趨勢(shì)并不相同，我們推測(cè)Foxp1對(duì)B細(xì)胞負(fù)向免疫調(diào)控功能可能具有潛在的誘導(dǎo)作用，而其對(duì)B細(xì)胞抗感染免疫應(yīng)答的調(diào)控作用以及在B細(xì)胞亞群產(chǎn)生和功能中作用尚不明確，需要將來開展進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)深入探討。
　　 總之，深入研究B細(xì)胞及其亞群在不同感染模型中的功能及其機(jī)制將有助于我們進(jìn)一步了解B細(xì)胞在機(jī)體受到外來病原體或者異源抗原刺激后免疫應(yīng)答的啟動(dòng)、維持和調(diào)控中的作用，更加全面認(rèn)識(shí)機(jī)體復(fù)雜而平衡的免疫調(diào)控網(wǎng)絡(luò)，并為免疫細(xì)胞亞群認(rèn)識(shí)的拓展及