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文檔簡介
1、目的:通過檢測 B細胞培養(yǎng)上清中 IgG水平及樹突狀細胞、CD8+T細胞、CD4+T細胞培養(yǎng)上清中各細胞因子水平變化,探討 ITP患者外周血免疫細胞亞群的功能變化與疾病發(fā)生的關(guān)系,闡述 ITP發(fā)生的復(fù)雜機制,進一步指導(dǎo)ITP的治療。
方法:1.采用密度梯度離心法分離 ITP患者外周血單個核細胞;2.免疫磁珠分選術(shù)分別分選出 B細胞、樹突狀細胞、CD8+T細胞和 CD4+T細胞;3.應(yīng)用流式細胞儀檢測分選后 B細胞、樹突狀細胞、
2、CD8+T細胞和CD4+T細胞的純度;4.應(yīng)用ELISA法測定 B細胞培養(yǎng)上清中 IgG水平,樹突狀細胞培養(yǎng)上清中細胞因子 IL-2、IL-6、IL-12、IL-27、TNF-α和 IFN-γ的水平,CD8+T細胞培養(yǎng)上清中細胞因子 IL-2、IL-12、IL-17、TNF-α、IFN-γ和TGF-β的水平,CD4+T細胞培養(yǎng)上清中細胞因子IL-2、IL-4、IL-10、IL-17、TNF-α、IFN-γ和TGF-β的水平。
3、結(jié)果:1.ITP患者 IgG水平(16.79±1.12pg/ml)顯著高于對照組(5.18±0.79pg/ml)(P<0.01)。2. ITP患者樹突狀細胞培養(yǎng)上清中細胞因子IL-12、IL-27的含量(51.39±4.55pg/ml、178.07±50.31pg/ml)顯著高于對照組(23.64±2.82pg/ml、92.74±43.57pg/ml)(P<0.01)。3. ITP患者CD8+T細胞培養(yǎng)上清中細胞因子 TGF-β的含量(
4、203.26±48.51pg/ml)顯著低于對照組(395.80±74.05pg/ml)(P<0.01)。4. ITP患者CD4+T細胞培養(yǎng)上清中細胞因子IL-4、IL-10、IL-17的含量(17.26±2.11pg/ml、4.12±0.39pg/ml、15.89±1.31pg/ml)顯著高于對照組(10.53±1.32pg/ml、2.10±0.44pg/ml、9.42±0.24pg/ml)(P<0.01),而細胞因子 TGF-β的含
5、量(379.47±44.83pg/ml)顯著低于對照組(667.42±67.25pg/ml)(P<0.01)。
結(jié)論:1.ITP患者的IgG型抗體明顯升高,對IgG型抗體的測定對ITP的臨床診斷具有輔助意義。2.ITP患者樹突狀細胞分泌的IL-12、IL-27細胞因子量較對照組升高,提示 ITP患者樹突狀細胞有可能通過增加分泌 IL-12、IL-27參與ITP的發(fā)病。3. CD8+T細胞可能通過分泌TGF-β發(fā)揮的免疫調(diào)節(jié)的作
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