祛瘀解毒法對(duì)血瘀蘊(yùn)毒型子宮內(nèi)膜異位癥卵泡液及顆粒細(xì)胞TNF-α、IL-6的研究.pdf

1、目的:觀察祛瘀解毒顆粒結(jié)合輔助生殖技術(shù)(ART)治療血瘀蘊(yùn)毒型子宮內(nèi)膜異位癥不孕的療效并探討其作用機(jī)理,試圖開(kāi)辟中醫(yī)藥治療EM不孕的新思路,為臨床有效治療該病提供依據(jù)。方法:臨床研究:60例子宮內(nèi)膜異位癥(EM)不孕患者隨機(jī)分為治療組和對(duì)照組,每組30例。治療組有20例口服祛瘀解毒顆粒結(jié)合氯米芬(CC)促排卵+宮腔內(nèi)人工授精(IUI);另外10例口服祛瘀解毒顆粒同時(shí)行IVF-ET。對(duì)照組有20例單純給CC促排卵+IUI,另外10例行IV

2、F-ET。觀察治療前后血瘀蘊(yùn)毒證候積分變化、妊娠率、免疫及內(nèi)分泌學(xué)相關(guān)指標(biāo)、血清和卵泡液TNF-α、IL-6含量以及卵巢顆粒細(xì)胞TNF-αmRNA、IL-6mRNA的表達(dá)情況。實(shí)驗(yàn)研究一:40例EM模型大鼠隨機(jī)分為試驗(yàn)組、觀察組各20例,另取20只大鼠只牽拉子宮作為空白組。試驗(yàn)組每天給予祛瘀解毒顆粒溶于2ml生理鹽水灌胃,觀察組和空白組均給予2ml生理鹽水,連續(xù)灌胃3周。末次給藥后24h各組大鼠均給予人絕經(jīng)后促性腺激素(HMG)50IU

3、腹腔注射,48h后給予人絨毛膜促性腺激素(HCG)100IU/100g,14～16h后處死大鼠收集卵細(xì)胞及顆粒細(xì)胞團(tuán),觀察優(yōu)質(zhì)卵細(xì)胞數(shù)目及優(yōu)質(zhì)卵細(xì)胞率,采用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)法檢測(cè)卵巢顆粒細(xì)胞TNF-αmRNA、IL-6mRNA表達(dá)。實(shí)驗(yàn)研究二:配制不同的培養(yǎng)液,對(duì)20只小鼠超排卵共收集189枚2-細(xì)胞鼠胚分別放入各組培養(yǎng)液進(jìn)行培養(yǎng)。其中治療組培養(yǎng)液為P-1胚胎培養(yǎng)液加10％SSS加10%治療組EM患者卵泡液;對(duì)照組為培

4、養(yǎng)液P-1胚胎培養(yǎng)液加10%SSS加10%對(duì)照組EM患者卵泡液;空白組培養(yǎng)液為P-1胚胎培養(yǎng)液加10%SSS加10%空白組人卵泡液。每日在顯微鏡下觀察小鼠胚胎情況。結(jié)果:1.祛瘀解毒顆粒能夠有效改善患者血瘀蘊(yùn)毒證候,提高妊娠率,降低EMAb的陽(yáng)性率及CA125水平,改善內(nèi)分泌狀態(tài),降低患者血清及卵泡液TNF-α、IL-6的含量,降低卵巢顆粒細(xì)胞TNF-αmRNA、IL-6mRNA的表達(dá),效果明顯優(yōu)于對(duì)照組(P＜0.05)。2.試驗(yàn)組大鼠

5、優(yōu)質(zhì)卵細(xì)胞數(shù)目、優(yōu)質(zhì)卵細(xì)胞率明顯高于觀察組(P＜0.05),顆粒細(xì)胞TNF-αmRNA、IL-6mRNA表達(dá)明顯低于觀察組(P＜0.05)。3.小鼠2-細(xì)胞胚胎在治療組及空白組培養(yǎng)液中發(fā)育到8-細(xì)胞期、桑葚胚及囊胚及優(yōu)質(zhì)胚胎的比率均明顯高于對(duì)照組(P＜0.05)。結(jié)論:祛瘀解毒顆?？梢愿纳蒲鎏N(yùn)毒癥候,提高EM不孕患者妊娠率,是治療血瘀蘊(yùn)毒型子宮內(nèi)膜異位癥的有效藥物。推測(cè)其作用機(jī)理可能與調(diào)節(jié)免疫功能,改善內(nèi)分泌狀態(tài),降低卵泡液TNF-α