TIE2配體寡肽的設計、篩選及其在基因治療中的靶向導入作用.pdf

1、腫瘤基因治療將成為除手術、放療和化療等方法外又一新的抗癌策略.尤其在抗腫瘤轉移和復發(fā)方面將起重要作用.目前還缺乏將基因導入人體細胞的高效靶向性載體系統(tǒng),這是基因治療至今尚未成為臨床常規(guī)治療措施的關鍵因素之一.因此研發(fā)一種高效靶向性基因導入系統(tǒng)成為當務之急.該研究旨在建立一種靶向Tie2受體的非病毒基因導入系統(tǒng)并檢驗其有效性,為今后腫瘤的基因治療提供可靠的理論依據與實踐指導.第一部分 Tie2配體寡肽的設計與篩選;目的:掌握特定受體的配體

2、寡肽的設計與篩選方法;獲得Tie2受體的候選配體寡肽;第二部分 GA3、GA4和GA5與Tie2在體內及體外特異性結合試驗;目的:檢測GA3、GA4和GA5與Tie2在體內和體外特異性結合能力;方法:<'125>I標記GA3、GA4和GA5,然后分別在SMMC7721-Ex Tie2細胞及Tie2表達陽性的肺腺癌SPC-A1細胞裸鼠種植瘤中進行體外、體內結合試驗,采用競爭法檢測結合特異性.第三部分 GA3和GA5基因導入系統(tǒng)的構建及其轉

3、導報告基因的體外與體內靶向導入試驗;目的:構建GA3和GA5基因導入系統(tǒng)并檢測其轉運基因的靶向性.第四部分 GA3和GA5基因導入系統(tǒng)轉導p53基因的體內靶向性基因治療試驗;目的:檢測GA3和GA5基因導入系統(tǒng)轉導p53基因的體內靶向性基因治療效果,為基因治療的臨床應用提供實驗依據.方法:該實驗采用4周齡雌性裸數鼠(BALB/c).人肺癌SPC-A1種植瘤接種于裸鼠皮下,當種瘤直徑達0.4-0.5cm時,挑選腫瘤大小均勻的動物隨機分為7