HMGB1對(duì)SSc患者皮膚成纖維細(xì)胞活化及Coll、Fn表達(dá)的影響.pdf

1、目的:探討高遷移率族蛋白-1(HMGB1)體外對(duì)健康人與系統(tǒng)性硬化癥(SSc)患者皮膚成纖維細(xì)胞活化及Ⅰ型膠原(ColⅠ)、纖連蛋白(Fn)表達(dá)的影響。
　　方法:采用原代組織塊培養(yǎng)法，培養(yǎng)健康人與SSc患者皮膚成纖維細(xì)胞，形態(tài)學(xué)及波形蛋白免疫細(xì)胞化學(xué)法鑒定，選取第4-6代細(xì)胞進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。予以不同終濃度的HMGB1處理皮膚成纖維細(xì)胞24、48、72h，采用MTT法觀察皮膚成纖維細(xì)胞的增殖情況;予以終濃度為0.5μ g/ml的HMGB

2、1處理皮膚成纖維細(xì)胞48h，0μ g/ml的HMGB1為對(duì)照組，Western-Blot法檢測(cè)α平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-SMA)蛋白的表達(dá);Real-Time PCR法檢測(cè)ColⅠ及Fn的mRNA表達(dá)。
　　結(jié)果:1.兩組細(xì)胞形態(tài)相似，波形蛋白免疫細(xì)胞化學(xué)法陽(yáng)性鑒定為成纖維細(xì)胞;2.不同終濃度的HMGB1刺激成纖維細(xì)胞24、48、72h后，MTT結(jié)果提示HMGB1終濃度為0.5μ g/ml時(shí)，輕度抑制健康人皮膚成纖維細(xì)胞增殖，而對(duì)SS

3、c患者組成纖維細(xì)胞則無(wú)影響;3.Western-Blot結(jié)果提示HMGB1刺激健康人與SSc患者皮膚成纖維細(xì)胞后α-SMA蛋白的表達(dá)均較對(duì)照組增加（p＜0.05），SSc患者α-SMA蛋白表達(dá)量高于健康人（p＜0.01）;4.Real-Time PCR結(jié)果提示HMGB1刺激后SSc患者皮膚成纖維細(xì)胞ColⅠ及Fn mRNA的表達(dá)較對(duì)照組增加（p＜0.05）。
　　結(jié)論:1.HMGB1可以誘導(dǎo)健康人與SSc患者皮膚成纖維細(xì)胞向肌成纖