低氧對系統(tǒng)性硬皮病患者皮膚成纖維細(xì)胞膠原蛋白合成及膠原基因表達(dá)的影響.pdf

1、系統(tǒng)性硬皮病患者成纖維細(xì)胞合成膠原增多,引起皮膚硬化和內(nèi)臟器官纖維化.已有文獻(xiàn)顯示,低氧狀態(tài)下,正常人成纖維細(xì)胞生長加快,合成膠原增多.但缺氧能否引起系統(tǒng)性硬皮病患者皮膚成纖維細(xì)胞合成膠原蛋白增加,膠原基因表達(dá)增強,進而加重患者皮膚硬化和內(nèi)臟器官纖維化尚未見文獻(xiàn)報道.目的:研究低氧對系統(tǒng)性硬皮病患者和正常皮膚成纖維細(xì)胞膠原蛋白合成及膠原基因表達(dá)的影響.方法:1.以組織塊培養(yǎng)法建立5個系統(tǒng)性硬皮病患者和5個正常皮膚成纖維細(xì)胞系;2.將成纖

2、維細(xì)胞分別放入20％正常氧分壓和2％的低氧分壓環(huán)境中培養(yǎng),分別于放入的第3天和第6天.用分光光度儀測定細(xì)胞培養(yǎng)基上清液中羥脯氨酸含量并折算成膠原蛋白含量;3.將SSc患者和正常皮膚成纖維細(xì)胞分別在20％正常氧分壓和2％低氧分壓環(huán)境中培養(yǎng)3天,用TRIzol提取細(xì)胞總RNA,用RT-PCR方法測定其中Ⅰ型和Ⅲ型膠原基因的表達(dá).結(jié)論:低氧狀態(tài)下,無論是正常皮膚還是系統(tǒng)性硬皮病患者皮膚成纖維細(xì)胞膠原蛋白合成均有增加,Ⅰ型和Ⅲ型膠原基因表達(dá)也均