中藥寒熱性代謝組學(xué)判別模式的建立研究.pdf

1、目的:
　　中藥藥性理論是傳統(tǒng)中醫(yī)藥學(xué)的核心內(nèi)容,其中寒熱藥性更是占據(jù)其主導(dǎo)地位。傳統(tǒng)的中藥藥性理論多源于經(jīng)驗(yàn),目前的中藥現(xiàn)代化的研究多基于在西藥學(xué)植物化學(xué)及天然藥物化學(xué)理論指導(dǎo)下的單體成分研究,而較少涉及以中醫(yī)藥學(xué)自身思維特點(diǎn)為基礎(chǔ),從藥性方面入手進(jìn)行系統(tǒng)研究。代謝組學(xué)作為系統(tǒng)生物學(xué)的新興學(xué)科,其借助代謝組學(xué)技術(shù)整體系統(tǒng)的研究方式與中醫(yī)藥學(xué)傳統(tǒng)理論相符合。本研究擬根據(jù)傳統(tǒng)中藥的四氣分類,選取寒熱藥性為研究代表,探索寒熱不同藥性的

2、中藥作用于生物體內(nèi)引起的代謝產(chǎn)物的變化。根據(jù)這些變化,尋找藥物寒熱藥性與代謝產(chǎn)物變化的關(guān)系,在此基礎(chǔ)上篩選出具有寒熱藥性的特征性的候選代謝產(chǎn)物,并建立可用于鑒定中藥寒熱藥性的特征性的判別模式,為中藥藥性判定提供確切的分子理論基礎(chǔ),并可用于中藥學(xué)新藥的開發(fā)及藥性鑒定,對(duì)丁中藥現(xiàn)代化研究的思維模式轉(zhuǎn)變具有一定的促進(jìn)作用,為中西醫(yī)結(jié)合用藥提供更為可靠的理論依據(jù)。
　　材料與方法:
　　1.中藥給藥前后大鼠血清采集:選取19味中藥單

3、藥顆粒,根據(jù)藥物四氣分為熱、寒兩組,寒性藥物組含10味藥材,熱性藥物組含9味藥材,同時(shí)設(shè)立溶劑對(duì)照組及窄白對(duì)照組。將SD大鼠在相同條件下飼養(yǎng)6天后行眼眶靜脈叢取血,收集血清,作為給藥前對(duì)照樣本。取血后給予單藥灌胃7天,每日次,給藥量為人體常用劑量/人標(biāo)準(zhǔn)體重*20,劑量為2ml/只/天。于第7天給藥后兩小時(shí)再次眼眶靜脈叢取血,收集血清。
　　2.代謝組學(xué)分析:將給藥前后的血清經(jīng)過除蛋白、凍干等預(yù)處理之后,進(jìn)行基于HPLC-TOFM

4、S(高效液相色譜-飛行時(shí)間質(zhì)譜)的血清全組分代謝組學(xué)分析。
　　3.將原始數(shù)據(jù)經(jīng)過R統(tǒng)計(jì)軟件,進(jìn)行l(wèi)檢驗(yàn)及PLS-DA分析判別,得到各種代謝物的相關(guān)信息,建立基于中藥寒熱藥性的代謝組學(xué)判別模型。
　　4.以t檢驗(yàn)P值小于0.05為標(biāo)準(zhǔn),確定不同組間比較所得差異代謝物化合物。
　　結(jié)果:
　　1.通過HPLC-TOF/MS檢測(cè),可以有效并且系統(tǒng)檢測(cè)出中藥對(duì)于機(jī)體代謝層面的改變。
　　2.通過HPLC-TOF/

5、MS檢測(cè),可檢測(cè)出寒熱不同藥性藥物引起機(jī)體的代謝改變。其中得到熱性藥物特異性改變代謝物41種,寒性藥物特異性改變代謝物30種。
　　3.通過PLS-DA方法可初步建立區(qū)分寒熱藥性差異的判別模型,該模型可解釋85.3％分類信息,模型預(yù)測(cè)能力為61.8％。
　　結(jié)論:
　　1.通過高效液相色譜-飛行時(shí)間質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)可以系統(tǒng)并且全面的檢測(cè)出中藥作用于機(jī)體引起的代謝層面的改變。
　　2.寒性藥物和熱性藥物作用于機(jī)體都存在