卷柏中穗花杉雙黃酮降糖作用機(jī)制研究.pdf

1、　　目的 研究卷柏中穗花杉雙黃酮的降糖活性,探討其治療糖尿病的潛在機(jī)制。
　　方法 雄性ICR小鼠以高糖高脂飼料飼養(yǎng)誘發(fā)胰島素抵抗, 8周后腹腔注射100mg/kg STZ建立糖尿病模型以20mg/kg、40mg/kg、60mg/kg穗花杉雙黃酮連續(xù)給藥8周,觀察穗花杉雙黃酮對(duì)糖尿病小鼠血糖、血脂水平、抗氧化水平及對(duì)胰島素和胰高血糖素調(diào)節(jié)的影響,探討卷柏穗花杉雙黃酮治療糖尿病的特點(diǎn)。檢測(cè)穗花杉雙黃酮對(duì)糖尿病小鼠血清中ALT、A

2、ST、BUN、CREA,肝臟指數(shù)和腎臟指數(shù)的影響,來(lái)評(píng)價(jià)穗花杉雙黃酮對(duì)糖尿病小鼠肝腎功能的影響。采用光鏡觀察肝臟、胰腺病理形態(tài),采用western blot法測(cè)定肝臟組織中PI3K的蛋白表達(dá)水平和肌肉組織中PI3K、Akt、pAkt的蛋白表達(dá)水平,免疫組化的方法檢測(cè)GLUT4在骨骼肌組織的表達(dá)情況。并采用ELISA法測(cè)定肝臟中葡萄糖激酶(GK)、磷酸果糖激酶?(PFK)、 丙酮酸激酶(PK)、糖原合成酶激酶3(GSK-3)、葡萄糖-6-

3、磷酸酶(G-6-Pase)的含量；糖異生關(guān)鍵酶,磷酸烯醇丙酮酸羧基酶(PEPCK)的活性,從而研究卷柏中穗花杉雙黃酮降血糖作用特點(diǎn)及其作用機(jī)制。
　　結(jié)果 穗花杉雙黃酮各劑量能降低糖尿病小鼠的空腹血糖(FBG)、胰高血糖素、甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-c)、丙二醛(MDA)等,與模型組相比具有顯著性差異(p<0.05、p<0.01)；能升高胰島素、超氧化物歧化酶(SOD)；降低肝臟指數(shù)及丙氨

4、酸轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草氨酸(AST)水平,對(duì)腎臟指數(shù)及血尿素氮(BUN)、肌酐(CREA)無(wú)影響。HE染色結(jié)果顯示,穗花杉雙黃酮各劑量均能明顯明顯修復(fù)胰島組織,改善肝臟中脂肪滴蓄積,恢復(fù)肝臟正常形態(tài)。Western-blot法結(jié)果顯示：穗花杉雙黃酮能不同程度增加肌肉組織組織pAkt蛋白表達(dá),免疫組化結(jié)果顯示穗花杉雙黃酮增加骨骼肌組織GLUT4的表達(dá)。穗花杉雙黃酮各劑量組能不同程度的增強(qiáng)葡萄糖激酶、6-磷酸果糖激酶1、丙酮酸激酶的活性(