SDF-1-CXCR-4在rhEPO聯(lián)合hUc-MSCs干預(yù)未成熟腦白質(zhì)損傷模型中的作用.pdf

1、目的:探討應(yīng)用人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells，hUC-MSCs)聯(lián)合重組人促紅細(xì)胞生成素(Recombinant Human Erythropoietin，rhEPO)干預(yù)早產(chǎn)兒腦白質(zhì)損傷模型后基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1（stromal derived factor1，SDF-1）及其受體CXC家族趨化因子4（C-X-C chemokine receptor4，CXCR

2、-4）的動態(tài)變化情況，探討SDF-1/CXCR-4軸在未成熟腦白質(zhì)損傷模型中干細(xì)胞修復(fù)和歸巢的可能機制。
　　方法：3日齡清潔級Sprague-Dawley大鼠，隨機分為缺血缺氧組(HI組)、假手術(shù)組（Sham組）、重組人促紅細(xì)胞生成素組(rhEPO組)、人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞組（hUC-MSCs組）和重組人促紅細(xì)胞生成素聯(lián)合人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞組(rhEPO+hUC-MSCs組)，除Sham組外，其余四組均結(jié)扎左側(cè)頸總動脈并吸入6％的

3、氮氧混合氣體4h，Sham組僅游離血管，不予結(jié)扎及缺氧處理，hUC-MSCs組和rhEPO+ hUC-MSCs組術(shù)后24小時內(nèi)腹腔內(nèi)注射0.5ml人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞(hUC-MSCs)2×106/ml，rhEPO組及rhEPO+ hUC-MSCs組于手術(shù)后立即經(jīng)腹腔注射重組人促紅細(xì)胞生成素（rhEPO:5000u/kg），連續(xù)注射三天(即P3、P4及P5)，HI組及Sham組注射相同劑量PBS溶液。分別在5、7和14天，運用免疫組化及q

4、RT-PCR檢測各組大鼠腦白質(zhì)中SDF-1、CXCR-4表達(dá)情況，在第14天，采用HE染色觀察大體病理變化。隨訪觀察大鼠體重至28天，并在28天對各組大鼠進行神經(jīng)行為學(xué)檢測。
　　結(jié)果：rhEPO及hUC-MSCs干預(yù)未成熟腦白質(zhì)損傷模型可減少損傷面積，P7天后rhEPO及hUC-MSCs組體重較HI組明顯增加，兩者聯(lián)用時大鼠的體重增加更為顯著。P28天時，rhEPO及hUC-MSCs組神經(jīng)行為學(xué)評分較HI組增高，兩者聯(lián)用時大鼠的

5、神經(jīng)行為學(xué)評分更高。hUC-MSCs+ rhEPO、rhEPO組在三個時間點SDF-1表達(dá)高于hUC-MSCs組、HI組和Sham組（P均＜0.01）。hUC-MSCs+ rhEPO組在三個時間點SDF-1表達(dá)高于rhEPO組(P＜0.01)。hUC-MSCs+ rhEPO及rhEPO組SDF-1 P5d就出現(xiàn)表達(dá)增加，P7d時表達(dá)達(dá)到高峰，P14d表達(dá)量雖有下降但仍能維持較高水平。hUC-MSCs+ rhEPO組、hUC-MSCs組C

6、XCR-4表達(dá)在三個時間點分別高于HI組、Sham組及rhEPO組（P均＜0.01），hUC-MSCs+ rhEPO組CXCR-4蛋白表達(dá)水平在三個時間點均高于hUC-MSCs組(P＜0.01)，P5d即出現(xiàn)CXCR-4表達(dá)的增加，隨時間的推移表達(dá)量增加越發(fā)明顯，至P14d時達(dá)到了最高，與SDF-1表達(dá)高峰存在時間差異。
　　結(jié)論：hUC-MSCs及rhEPO干預(yù)早產(chǎn)兒腦白質(zhì)損傷模型后可減小損傷面積，促進神經(jīng)修復(fù)，改善體格發(fā)育及遠(yuǎn)