激光照射后大鼠牙髓防御修復機制的實驗研究.pdf

1、目的：通過建立大鼠牙本質(zhì)過敏癥的模型，用脫敏劑量的脈沖CO2激光照射，觀察牙髓組織中熱休克蛋白70(HSP70)、轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)和骨形成蛋白2(BMP-2)在不同時間段和部位的表達情況，并用透射電鏡觀察微觀變化，分析各觀察指標在損傷防御和自我修復過程中的生物學意義，進一步探討牙髓組織經(jīng)激光照射后的損傷修復機制。 方法：18周齡雌性Sprague-Dawley(SD)大鼠45只經(jīng)牙本質(zhì)過敏癥模型制備后，常規(guī)喂養(yǎng)十

2、天，隨機分為5組，每組九只，即A組(激光照射后4小時處死組)、B組(激光照射后3天處死組)、C組(激光照射后2周處死組)、D組(激光照射后4周處死組)和N組(激光未照射組)。大鼠處死后立即截取左側(cè)上頜第一磨牙(M1)、第二磨牙(M2)、第三磨牙(M3)連同部分頜骨標本共40例(每組8只)，進行HE染色和免疫組織化學分析。在每組中隨機抽取一只大鼠，處死后劈開左側(cè)上頜M1牙冠，取出牙髓經(jīng)固定后切片，進行透射電鏡觀察。應用Image-ProP

3、lus5.0圖像分析處理軟件測得免疫組化圖像的平均OD值，所得數(shù)據(jù)應用SPSS11.5統(tǒng)計軟件，秩和檢驗Kruskal-Wallis法、Nemenyi法以及完全隨機設計單因素方差分析(One-wayANOVA)和LSD-t檢驗。 結(jié)果：脈沖CO2激光照射后HE染色結(jié)果：成牙本質(zhì)細胞空泡性變和牙髓血管充血和出血情況的數(shù)據(jù)經(jīng)統(tǒng)計學分析后得出：A組和C組、D組、N組差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，A組和B組差異無統(tǒng)計學意義。炎細胞浸

4、潤情況在B組達最高峰，至四周時牙髓恢復正常。D組中可見部分第三期牙本質(zhì)形成。牙髓中HSP70的表達情況經(jīng)統(tǒng)計學分析后發(fā)現(xiàn)：A組、B組、C組、D組、N組冠髓中的平均OD值分別為：0.3610±0.0380，0.2132±0.0341，0.1951±0.0208，0.1765±0.0381，0.1932±0.0460，A組與其余各組差異均有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。牙髓中TGF-β1的表達情況經(jīng)統(tǒng)計學分析后發(fā)現(xiàn)：A組、B組、C組、D組、N

5、組冠髓中的平均OD值分別為：0.2186±0.0446，0.3095±0.0526，0.3798±0.0296，0.3142±0.0628，0.2353±0.0415，C組與其余各組差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。牙髓中BMP-2的表達情況經(jīng)統(tǒng)計學分析后發(fā)現(xiàn)：A組、B組、C組、D組、N組冠髓中的平均OD值分別為：0.1821±0.0448，0.1896±0.0170，0.3245±0.0307，0.3458±0.0278，0.2052

6、±0.0271，D組與其余各組差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。透射電鏡顯示：A組和B組：成牙本質(zhì)細胞核周間隙輕度擴張，粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中度擴張，有的呈囊泡狀，并有脫顆?，F(xiàn)象，部分線粒體嵴和基質(zhì)出現(xiàn)降解。吞噬細胞胞體大，多突起，細胞器豐富，富有大量溶酶體顆粒和大量吞噬泡。C組和D組：電鏡下形態(tài)和N組相似，成牙本質(zhì)細胞胞質(zhì)豐富，富有粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、核糖體、線粒體，核上區(qū)有發(fā)育良好的高爾基復合體區(qū)，含多層扁平囊、大泡、小泡。粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)帶狀，附著核糖體