分支桿菌菌體裂解物增強(qiáng)雞體免疫力及其作用機(jī)理研究.pdf

1、接種卡介苗是當(dāng)今各國(guó)預(yù)防結(jié)核病最有效的手段之一。分支桿菌屬的成員如草分支桿菌、母牛分支桿菌等也被廣泛的應(yīng)用于疫苗和佐劑的制備。但是，由于是全菌制劑，菌體中對(duì)免疫功能無(wú)作用、甚至起抑制作用的成分同時(shí)存在在疫苗中，卡介苗使結(jié)核菌素的皮試出現(xiàn)陽(yáng)性反應(yīng)，因而限制了它們的應(yīng)用。本文從結(jié)核分支桿菌中提取菌體蛋白和多肽，通過(guò)生物化學(xué)的方法對(duì)其進(jìn)行定量檢測(cè)。經(jīng)過(guò)動(dòng)物試驗(yàn)，探討分支桿菌菌體蛋白和多肽對(duì)雞特異性免疫和非特異性免疫的效應(yīng)，最終篩選出一種低毒、

2、高效的新型免疫增強(qiáng)劑并確定了臨床最佳用藥劑量。 利用超聲波低溫破碎技術(shù)，提取、制備結(jié)核分支桿菌中的菌體蛋白和多肽，應(yīng)用生物化學(xué)方法(lowry法)測(cè)定菌體蛋白和多肽的含量；Tricine-SDS—PAGE電泳分析菌體蛋白組分。試驗(yàn)結(jié)果表明：不同批次提取的菌體蛋白含量相對(duì)穩(wěn)定，沒(méi)有明顯差異：組分分析結(jié)果表明，菌體蛋白由多種組分構(gòu)成，分子量由66kD到6.5kD不等。 按人常用劑量，根據(jù)人/雞體表面積比，計(jì)算雞用藥量。利用所提取的結(jié)核分支桿

3、菌菌體蛋白和多肽投服試驗(yàn)雞。210只雞被均分為分支桿菌菌體蛋白高劑量組(0.9mg/只)、分支桿菌菌體蛋白中劑量組(0.45mg/只)、分支桿菌菌體蛋白低劑量組(O.225 mg/只)、透析多肽組(0.3mg/R)、未破碎全菌體組(0.3g/只)、分支桿菌菌體蛋白注射組(0.45mg/只)和對(duì)照組(生理鹽水)七個(gè)組。除注射組外，其余六組均采用口服給藥。各組試驗(yàn)雞于給藥后7d、14d、21d、28d分四次撲殺，分別檢測(cè)雞外周血淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化