CVB3感染對Hela細胞凋亡及4EBP1表達的影響.pdf

1、目的：用柯薩奇病毒B3(Coxsackievirus B3，CVB3)感染體外培養(yǎng)的Hela細胞，觀察CVB3感染對Hela細胞形態(tài)及凋亡變化的影響，以及對4EBP1表達的影響，探討細胞凋亡及4EBP1表達在CVB3感染中的意義。
　　 方法：以CVB3分別感染未饑餓及饑餓Hela細胞，觀察細胞形態(tài)學(xué)變化，并以膜聯(lián)蛋白V(FITC-Annexin V)聯(lián)合PI染色雙參數(shù)技術(shù)(Annexin V/PI法)定量檢測饑餓Hela細胞凋

2、亡變化，RT-PCR法及Real-time PCR法檢測未饑餓及饑餓Hela細胞中4EBP1的表達，應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學(xué)分析，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　 結(jié)果：⑴Hela細胞形態(tài)學(xué)變化：CVB3感染Hela細胞后，可引起細胞病變效應(yīng)(cytopathic effect，CPE)，光鏡下細胞形態(tài)發(fā)生改變，細胞變圓變暗，漂浮成空泡狀或呈葡萄串樣聚集。⑵Hela細胞的凋亡變化：CVB3感染Hela細

3、胞后，細胞出現(xiàn)凋亡變化，病毒組各時間點Hela細胞凋亡率明顯高于對照組(P<0.05)，且在一定時間段內(nèi)凋亡程度隨時間延長而增加。⑶RT-PCR及Real-time PCR檢測未饑餓Hela細胞4EBP1表達：對照組及病毒組Hela細胞中均有4EBP1表達，病毒組與對照組各時間點比較，4EBP1表達減少(P<0.05)。且隨病毒感染時間延長，4EBP1表達下降(P<0.05)。⑷RT-PCR及Real-time PCR檢測饑餓后的Hel

4、a細胞4EBP1表達：對照組及病毒組Hela細胞中均有4EBP1表達，病毒組與對照組比較4EBP1表達降低(P<0.05)，且隨病毒感染時間延長，4EBP1表達下降(P<0.05)。⑸饑餓組與非饑餓組比較，非饑餓組4EBP1表達低于饑餓組(P<0.05)，提示營養(yǎng)因素可影響4EBP1的表達。
　　 結(jié)論：①CVB3感染Hela細胞后可使Hela細胞發(fā)生凋亡，并隨著病毒感染時間的延長，細胞凋亡增多，提示細胞凋亡參與CVB3的致病機