血漿鐵蛋白,鐵代謝關(guān)鍵基因及其交互作用與冠心病的相關(guān)性.pdf

1、雖然鐵是人體代謝必需的微量元素，但過(guò)量的鐵參與很多病理過(guò)程，包括冠心?。–oronary Heart Disease，CHD）的發(fā)生和發(fā)展。病理學(xué)和動(dòng)物學(xué)實(shí)驗(yàn)均證實(shí)鐵負(fù)荷水平與冠心病發(fā)生有關(guān)，流行病學(xué)研究卻得到了矛盾結(jié)果，這可能與未考慮機(jī)體鐵代謝的遺傳背景有關(guān)。我們將采用1：1 病例－對(duì)照配對(duì)研究，選取1334 對(duì)冠心病病例和對(duì)照為研究對(duì)象，用熒光定量PCR儀對(duì)鐵代謝通路中的關(guān)鍵蛋白質(zhì)HFE （Hemochromatosis，HFE）和

2、轉(zhuǎn)鐵蛋白受體2（transferrin receptor2，TFR2）進(jìn)行基因分型，酶聯(lián)免疫吸附法（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）檢測(cè)血漿鐵蛋白，反映機(jī)體鐵負(fù)荷水平；運(yùn)用Logistic 回歸研究鐵蛋白水平與HFE和TFR2基因的交互作用，以及HFE和TFR2基因多態(tài)性在冠心病發(fā)生中的主效應(yīng)和基因－基因交互作用，探討冠心病發(fā)生的分子機(jī)制。我們的研究有助于闡明鐵負(fù)荷水平與冠心病的關(guān)系和冠心

3、病可能的分子機(jī)制；并對(duì)促進(jìn)冠心病患者早期篩檢和個(gè)體化干預(yù)方案建立具有重要現(xiàn)實(shí)意義。
　　 第一部分、血漿鐵蛋白、HFE基因多態(tài)性與冠心病相關(guān)性的研究
　　 目的：病理學(xué)和動(dòng)物學(xué)實(shí)驗(yàn)均證實(shí)鐵負(fù)荷水平與冠心病發(fā)生和發(fā)展有關(guān)，流行病學(xué)研究卻得到了矛盾結(jié)果，HFE基因是遺傳性血色素沉著癥候選基因，有研究證實(shí)與血漿鐵負(fù)荷相關(guān)，我們將用病例－對(duì)照研究的方法在中國(guó)漢族人群中探討HFE基因多態(tài)性、血漿鐵蛋白與冠心病的相關(guān)性。
　　

4、 方法：采用病例－對(duì)照研究，選取1334個(gè)冠心病病人及1334個(gè)與其性別、年齡（±1）匹配的對(duì)照，使用ELISA 測(cè)量血漿鐵蛋白水平和血漿Hepcidin 水平，Taqman－MGB 探針檢測(cè)HFE 單核苷酸多態(tài)性（Single nucleotide polymorphism，SNP）。
　　 結(jié)果：病例組中血漿鐵蛋白水平明顯高于對(duì)照組（197.9 ug/L [2.7 to 932.9 ug/L] vs179.9 ug/L [

5、21.1 to 878.2 ug/L]，P=0.028），四分位危險(xiǎn)度（oddds ratios，Ors）分別為1.0（參照），0.93 (0.76-1.13)，1.23 (1.02-1.48)（P=0.028）。對(duì)冠心病危險(xiǎn)因素進(jìn)行校正后，病例組和對(duì)照組的Ors 無(wú)顯著性差異。在HFE基因rs 9366637中，與TT 型等位基因相比，攜帶C等位基因的患冠心病的危險(xiǎn)度增加（TC的OR=1.35，CC的OR=1.76; P ≤0.001

6、），對(duì)冠心病危險(xiǎn)因素進(jìn)行校正后，結(jié)果無(wú)改變。Rs 9366637不同基因型之間的血漿鐵蛋白水平和血漿Hepcidin 水平差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＝0.52）。
　　 結(jié)論：血漿鐵蛋白與冠心病風(fēng)險(xiǎn)無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，在中國(guó)漢族人群中HFE基因SNPrs 9366637 攜帶C等位基因的患冠心病的危險(xiǎn)度增加，r s 9366637不同基因型之間的血漿鐵蛋白水平和血漿Hepcidin水平差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 第二部分、血漿鐵蛋白、

7、TFR2基因多態(tài)性與冠心病相關(guān)性的研究
　　 目的：TFR2是一種鐵轉(zhuǎn)運(yùn)和鐵穩(wěn)態(tài)調(diào)節(jié)蛋白，TFR2的突變可導(dǎo)致遺傳性血色病III型的發(fā)生，有研究證實(shí)TFR2與鐵轉(zhuǎn)運(yùn)及鐵負(fù)荷相關(guān)。我們將用病例－對(duì)照研究的方法在中國(guó)漢族人群中探討TFR2基因多態(tài)性、血漿鐵蛋白與冠心病的相關(guān)性。
　　 方法：采用病例－對(duì)照研究，選取1334個(gè)冠心病病人及1334個(gè)與其性別、年齡（±1）匹配的對(duì)照，使用ELISA測(cè)量血漿鐵蛋白水平和血漿Hepc

8、idin水平，Taqman－MGB探針檢測(cè)TFR2基因上SNP s r s 7385804及rs 2075673的基因分型。
　　 結(jié)果：TFR2基因上SNPs rs 7385804及rs 2075673的基因型頻率在冠心病組和對(duì)照組之間無(wú)顯著性差異，對(duì)年齡、性別、吸煙、飲酒、高血壓及冠心病家族史等冠心病危險(xiǎn)因素進(jìn)行校正后，未發(fā)現(xiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05）,rs 7385804及rs 2075673不同基因型的血漿鐵蛋白水平和H

9、epcidin水平無(wú)顯著差異（P>0.05）。
　　 結(jié)論：TFR2基因rs 7385804及rs 2075673多態(tài)性與冠心病風(fēng)險(xiǎn)無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，并且不同基因型的血漿鐵蛋白水平和Hepcidin水平無(wú)顯著差異。
　　 第三部分、HFE與TFR2基因－基因交互作用在冠心病中的作用
　　 目的：對(duì)HFE及TFR2基因上共5個(gè)SNPs位點(diǎn)進(jìn)行基因－基因的交互作用進(jìn)行探討，以明確HFE及TFR2基因交互作用與冠心病危險(xiǎn)性

10、的相關(guān)性。
　　 方法：我們采用非條件Logistic 回歸分析模型，通過(guò)似然比檢驗(yàn)，探討HFE 及TFR2基因上共5個(gè)SNPs位點(diǎn)的基因－基因交互作用。
　　 結(jié)果：我們研究結(jié)果未發(fā)現(xiàn)HFE和TFR2基因5個(gè)SNP s位點(diǎn)間存在交互作用，對(duì)冠心病傳統(tǒng)危險(xiǎn)因素如吸煙、飲酒、年齡、性別、冠心病家族病史等進(jìn)行校正后，結(jié)果無(wú)改變，各基因位點(diǎn)間均未發(fā)現(xiàn)交互作用（P>0.05）。
　　 結(jié)論：我們未發(fā)現(xiàn)HFE與TFR2之間