玉米瘋頂病病原菌快速檢測和病害控制技術(shù)研究.pdf

1、玉米瘋頂病(Crazytop)是由大孢指疫霉(Sclerophthoramacrospora(Sacc.)Thirum.,ShawetNaras)引起的一種具有毀滅性的玉米霜霉病病害。本試驗基于1996年至2003年課題組對玉米瘋頂病研究所獲得的結(jié)果與進展，開展了病原菌的常規(guī)檢測和分子檢測、病害的誘發(fā)及防治方面的研究： 1.采用I2-ZnCl2染色、苯胺藍染色、棉藍乳酚油染色、MTT染色等四種染色法檢測不同時期玉米病組織及病田中

2、病株種子、正常株種子中的帶菌狀況、帶菌部位、病菌的存活能力。四種染色劑均能夠?qū)⒉≡焰咦犹禺愋缘厝旧⑼参锝M織結(jié)構(gòu)明顯地區(qū)分開，達到快速的檢測目的。其中I2-ZnCl2染色方法能觀察到被染成橘紅色或紫紅色的鹿角狀菌絲體、吸器以及雄器，具有對卵菌特異性染色特點，能夠有效將大孢指疫霉菌絲體與其它常見真菌的菌絲體加以區(qū)別。 2.通過建立有效的提取微量DNA的方法，并利用通用引物ITS1/ITS4和卵菌特性引物DC6/ITS4進行套

3、式PCR，獲得一個約900bp的片段，片段克隆測序后，經(jīng)在NCBI數(shù)據(jù)庫中的BLAST比對，進行序列相似性分析，結(jié)果所測得序列同大豆疫霉菌和葡萄霜霉菌都存在非常高的相似性，可以確認(rèn)為卵菌，但暫時還無法認(rèn)定該片段即是大孢指疫霉，需要進一步的重復(fù)實驗。若結(jié)果肯定，預(yù)計可以設(shè)計特異性引物建立大孢指疫霉的分子檢測程序。 3.在溫室以不同的接種處理并采取苗期水淹的方式進行了玉米瘋頂病的誘發(fā)試驗，研究病田土壤、病殘體、病株果穗種子在病害傳播

4、中的作用，以及病害誘發(fā)的環(huán)境因素。結(jié)果表明，人工誘發(fā)玉米瘋頂病尚存在一些困難，卵孢子的萌發(fā)條件還未掌握。在田間，采取播種后至苗期多次淹水的方式，成功誘發(fā)了病害，感病品種的發(fā)病率達到45％以上。利用種衣劑甲霜靈錳鋅和殺毒礬對種子進行包衣處理，在病害的藥劑防治方面取得了一定效果，但距高效防治還有距離。 通過對玉米瘋頂病病原菌檢測技術(shù)和病害防治技術(shù)的研究，為病原快速鑒定、致病規(guī)律研究、病害流行傳播、人工誘發(fā)及田間防治積研究積累了經(jīng)驗并