野生菌黃傘的培養(yǎng)及多糖研究.pdf

1、本論文以本實驗室分離培養(yǎng)的野生黃傘(Pholiotaadiposa(Fr.)Quél.)為實驗材料，著重研究了黃傘液體培養(yǎng)工藝和菌絲體多糖提取工藝。采用體外抗自由基實驗、血清溶血素測定實驗(體液免疫功能)以及巨噬細胞吞噬率和吞噬指數(shù)實驗(單核-巨噬細胞功能)，探討了黃傘子實體提取多糖A1，菌絲體提取多糖A2和純化子實體精多糖PA的生物活性。 主要研究結(jié)果：1.通過五種固體培養(yǎng)基(GYM培養(yǎng)基、綜合PDA+蘋果汁培養(yǎng)基、揚氏培養(yǎng)基

2、、綜合PDA培養(yǎng)基以及MMN培養(yǎng)基)對黃傘菌絲生長影響的對比實驗，找出實驗條件下相對較理想的培養(yǎng)基為綜合PDA培養(yǎng)基。 2.運用單因素和正交實驗方法，得出黃傘最佳液體培養(yǎng)基配方：葡萄糖2％、酵母浸粉0.8％、VB1300μg、Mg2SO40.04％、KH2PO40.1％、K2HPO40.1％。 3.得出黃傘實驗范圍內(nèi)最佳液體培養(yǎng)條件：接種3塊菌種，在25℃，pH5.5，搖床轉(zhuǎn)速120r/m～140r/m條件下，培養(yǎng)12d

3、。 4.通過栽培研究，形成了一套黃傘高產(chǎn)栽培技術(shù)。 5.通過單因素試驗和正交試驗確定了黃傘菌絲體多糖提取最佳工藝，即菌絲體粉碎粒徑為160目、料水比1：25、提取時間2.5小時、提取溫度80℃、提取1次，醇析多糖時使用無水乙醇、乙醇加入量1：3.5、醇析12小時。 6.采用Sevag法和離子交換柱法進行了多糖純化研究，結(jié)果表明Sevag法處理兩次有較理想的蛋白處理效果，蛋白去除率70％，但多糖回收率偏低僅有66.

4、5％，而離子交換柱法蛋白去除效果不佳，僅31％。 7.紙層析實驗初步鑒定黃傘菌絲體多糖的組成為單一葡萄糖。但紙層析效果不佳，需做進一步實驗來確定黃傘菌絲體多糖的組成。 8.體外抗自由基實驗顯示，子實體提取多糖A1，菌絲體提取多糖A2和純化子實體精多糖PA具有較好的抗氧自由基和羥自由基作用。 9.體液免疫功能實驗中子實體提取多糖A1與菌絲體提取多糖A2實驗陽性；單核-巨噬細胞功能實驗中菌絲體提取多糖A2和純化子實體