AMPA受體GluR2膜轉位在丙泊酚后處理急性腦保護中的變化及PI3K的調控作用.pdf

1、目的:丙泊酚是目前最為常用的靜脈麻醉藥，能夠降低腦氧代謝率、顱內(nèi)壓，且具有抗氧化和抑制細胞凋亡的作用，從而能夠減輕腦缺血再灌注損傷。在前期實驗中，我們已經(jīng)發(fā)現(xiàn)丙泊酚后處理對大鼠腦缺血再灌注具有保護作用，且這一作用與α-氨基-3-羥基-5-甲基-4-異惡唑丙酸（amino-3-hydroxy-5-methylisoxazole-4-propionic acid，AMPA）受體GluR2亞基在突觸后膜的穩(wěn)定表達和PI3K(phosphoin

2、ositide-3-kinase)-Akt通路活化有關，但關于PI3K與AMPA受體GluR2亞單位之間是否存在聯(lián)系及其上下游調控機制尚不明確。本研究旨在觀察丙泊酚后處理腦保護作用中PI3K與AMPA受體GluR2亞單位相互作用方式及其上下游關系，從而為臨床腦缺血及其高危人群麻醉藥物的合理選擇提供理論依據(jù)。
　　 方法:雄性SD大鼠168只，體重260-280g，隨機分為6組，每組28只，分別為假手術組（S組）、缺血再灌注組（I

3、R組）、缺血再灌注+丙泊酚后處理組（P組）、假手術+PI3K抑制劑wortmannin組（W+S組）、缺血再灌注+PI3K抑制劑wortmannin組（W+IR組）、缺血再灌注+PI3K抑制劑wortmannin+丙泊酚后處理組（W+P組）。采用MCAO方法制作大腦中動脈栓塞模型，栓塞大鼠右側大腦中動脈60min后施行再灌注。P組大鼠于再灌注即刻經(jīng)股靜脈恒速泵入丙泊酚（20mg· kg-1· h-1，2h）;應用抑制劑組于再灌注前30m

4、in腹腔注射wortmannin0.6 mg·kg-1。術后12、24h進行改良神經(jīng)行為學評分(modified neurologicalseverity score，mNSS)及腦梗死體積測定;術后6h取腦片免疫金銀染色觀察含有GluR2的AMPA受體的運輸情況;6、12和24h取缺血側海馬，免疫共沉淀法檢測PI3K-AMPA受體GluR2亞單位復合物共表達;Western Blot法檢測GluR2亞單位及pGluR2亞單位在缺血側海

5、馬細胞的表達情況;ELISA法測定PI3K活性變化。
　　 結果:缺血再灌注損傷后24 h，與IR組相比，P組mNSS評分、腦梗死體積在各時間點均明顯降低。同時與IR組相比，P組缺血側海馬PI3K活性升高，PI3K-AMPA受體GluR2亞單位復合物表達增強，pGluR2表達降低，而電鏡結果顯示位于突觸后膜的GluR2表達量明顯升高（均P＜0.01）。而與IR組相比，W+IR組的各項結果無統(tǒng)計學意義（均P＞0.05）。與P組相比

6、，W+P組mNSS評分、腦梗死體積在各時間點均成升高趨勢，而缺血側海馬PI3K活性降低及PI3K-AMPA受體GluR2亞單位復合物表達減少，pGluR2表達上升，而位于突觸后膜的GluR2表達量明顯降低(P＜0.01或P＜0.05)。
　　 結論:丙泊酚后處理對局灶性缺血再灌注損傷大鼠具有急性保護作用，其機制可能為丙泊酚后處理(20mg·kg-1·h-1，2h)使得缺血側海馬PI3K活性升高，活化的PI3K與AMPA受體結合，