丙泊酚麻醉影響基底核GABAA受體調控前額葉皮層腦電活動的機制研究.pdf

1、目的:
　　基底核（nucleus basalis,NB）接受來自下丘腦和腦干促覺醒神經核團的神經投射，同時又發(fā)出神經纖維投射到大腦皮層，擔任網狀上行激活系統(tǒng)和皮層中繼核的作用。丙泊酚是臨床最為常用的靜脈麻醉藥，其主要的作用靶點為GABAA受體。然而NB及其內GABAA受體是否參與調控丙泊酚麻醉-覺醒的過程尚未明確。本實驗通過損毀NB或NB微注射GABAA受體激動劑或拮抗劑,觀察丙泊酚麻醉大鼠翻正反射消失（loss of righ

2、ting reflex,LORR）/恢復時間(return of righting reflex,RORR)及對前額葉皮層（frontal cortex,FC）腦電的影響，探討NB及GABAA受體在丙泊酚麻醉中的作用機制，為全麻機制研究提供新思路。
　　方法：
　　健康雄性SD大鼠50只，體重250-350g。本實驗分為兩部分，第一部分為NB損毀實驗，第二部分為NB微注射實驗。
　　第一部分：將20只大鼠隨機分為2組（

3、n=10）：①對照組，單側NB注入1μl磷酸鹽緩沖液；②損毀組，單側NB注入1μl非特異性損毀藥ibotenic acid(10μg/μl)，成功建模14天后開始實驗。首先,采用序貫法測定尾靜脈注射丙泊酚致大鼠LORR的50％有效劑量（50%effective dose，ED50）；其次,以50mg/kg/h的劑量尾靜脈持續(xù)泵入丙泊酚測定大鼠LORR；最后，單次尾靜脈注射12mg/kg的丙泊酚測定大鼠RORR，同時記錄大鼠在丙泊酚（50

4、mg/kg/h）麻醉狀態(tài)下的FC腦電活動。
　　第二部分：30只大鼠隨機分為3組:①A組（saline組），NB微注射1μl saline;②B組（muscimol組）, NB微注射1μl muscimol(GABAA受體激動劑，0.5μg/μl);③ C組（gabazine組），NB微注射1μl gabazine(GABAA受體拮抗劑，0.2μg/μl)，所有大鼠微注射速度均為0.25μl/min。微注射結束后，尾靜脈持續(xù)泵入丙

5、泊酚（50mg/kg/h）測定LORR。尾靜脈注射丙泊酚（12mg/kg）致大鼠LORR后，分別觀察微注射saline/muscimol/gabazine，對RORR的影響。最后，丙泊酚（50mg/kg/h）麻醉下,測定 NB微注射藥物后對FC腦電活性的變化。
　　結果：
　　第一部分：與對照組相比，IBA（ibotenic acid）損毀~44%單側NB神經元(P<0.05)。損毀組LORR的劑量-反應性曲線輕度左移（P>

6、0.05）。單側損毀NB未影響LORR（P>0.05），但顯著延長RORR（P<0.05），同時明顯增加丙泊酚麻醉（50mg/kg/h）狀態(tài)下前額葉皮層delta波的比率（P<0.05）。
　　第二部分：與saline組相比,NB微注射muscimol后延長RORR(P<0.05)，增加FC delta波的比率(P<0.05)，對LORR和ED50無明顯影響(P>0.05);NB微注射gabazine則縮短RORR(P<0.05)