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文檔簡介
1、本論文通過抗原和抗體的制備及半抗原的改造,進行了在動物可食用組織中喹烯酮殘留的ELISA快速檢測的方法學(xué)研究。 首先以鄰硝基苯胺為起始原料,經(jīng)四步反應(yīng)獲得了高純度的殘留標(biāo)示物3-甲基-喹噁啉-2-羧酸(MQCA)。并利用其分子結(jié)構(gòu)中已有的羧基為偶聯(lián)位點,以碳二亞胺法和蛋白進行偶聯(lián),完成了兩種偶聯(lián)物的制備(MQCA-BSA、MQCA-RSA),經(jīng)紫外光譜法鑒定偶聯(lián)成功。以兩種偶聯(lián)物為不同免疫原、采用不同的免疫時間間隔免疫新西蘭大白
2、兔,獲得多克隆抗體,抗體效價測定和特異性鑒定的實驗結(jié)果表明:兩種免疫原均能產(chǎn)生高效價的抗體,免疫間隔延長有利于效價提高,且以RSA為載體有利于避免針對蛋白載體的抗體產(chǎn)生。但間接競爭性ELISA法對抗體的靈敏度測定結(jié)果表明,IC50值較高,不能滿足殘留檢測的要求。 本論文認為導(dǎo)致ELISA檢測靈敏度較低的原因,是殘留標(biāo)示物和蛋白偶聯(lián)后的特征結(jié)構(gòu)發(fā)生改變,誘導(dǎo)產(chǎn)生的抗體不能夠?qū)τ坞xMQCA很好的識別,因此,設(shè)計了能夠最大化保留MQC
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