牙周致病菌Aa-LPS對組織特異性單核-巨噬細胞細胞因子表達的影響.pdf

1、目的：探討牙周致病菌伴放線放線桿菌(Actinobacillus actinomycetemcomitans,Aa)脂多糖(lipo poly saccharide,LPS)對不同血脂狀態(tài)下不同的組織器官來源的兔單核/巨噬細胞誘導(dǎo)的細胞因子表達的影響,以及外源性IL-10作用后的相應(yīng)的變化,為研究牙周炎與全身疾病間可能共同的免疫機制提供相關(guān)佐證,并為預(yù)防和治療牙周炎相關(guān)的系統(tǒng)性疾病提供思路。
　　方法：1、高脂飲食飼養(yǎng)建立新西蘭兔

2、高脂模型;2、建立同一個體(正常血脂及高脂血癥新西蘭兔)不同組織來源單核/巨噬細胞與牙周致病菌Aa-LPS、大腸桿菌E.coli-LPS以及外源性IL-10的共同培養(yǎng)的細胞模型;3、通過Real-timePCR及ELISA分別檢測牙周致病菌Aa-LPS和E.coli-LPS以及外源性IL-10共同作用后,細胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8mRNA及蛋白表達情況的變化。
　　結(jié)果：1、高脂飼養(yǎng)6周后,高脂飲食組血脂含

3、量明顯高于正常水平(P<0.05),高脂建模成功。2、Real-timePCR及ELISA檢測結(jié)果表明:(1)正常血脂新西蘭兔各部位單核/巨噬細胞在1μg/mlE.coli-LPS及Aa-LPS誘導(dǎo)下各細胞因子在mRNA水平及蛋白水平均明顯高于空白對照組(P<0.05),且Aa-LPS的誘導(dǎo)作用較E.coli-LPS強(P<0.05)。(2)正常血脂新西蘭兔不同部位的單核/巨噬細胞對Aa-LPS的反應(yīng)存在部位差異性(P<0.05)?？傮w

4、上,強弱順序依次為AM>Mo>KC>PM。(3)高脂血癥兔各部位單核/巨噬細胞在基線水平表達的細胞因子在mRNA水平及蛋白水平均普遍高于血脂正常的兔(P<0.05)。(4)不同部位單核/巨噬細胞在高脂血癥影響下對Aa-LPS的反應(yīng)不全相同:Mo及PM在高脂血癥影響下,受Aa-LPS刺激產(chǎn)生的TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8總體上高于血脂正常狀態(tài)(P<0.05),而AM及KC受高脂血癥影響,在Aa-LPS刺激下各炎癥因子表達呈下

5、降趨勢(P<0.05)。(5)以100ng/ml外源性IL-10預(yù)處理Aa-LPS刺激的正常及高脂血癥兔不同部位單核/巨噬細胞,TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8的表達總體呈下調(diào)趨勢(P<0.05)。
　　結(jié)論：1、牙周致病菌Aa-LPS具有強致炎性,能夠誘導(dǎo)不同部位單核/巨噬細胞細胞因子的表達。2、不同部位單核/巨噬細胞對Aa-LPS的刺激存在敏感性的差異。3、高脂血癥狀態(tài)下伴隨著TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-